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(1)图中a、b所示获得目的基因的方法是____________,请再写出一种获得目的基因的方法:________________________。 (2)培育“金色大米”的基因工程操作五步曲中,其核心是__________________。图中c称作________,形成c需要用到________酶将______________进行连接。 (3)据图分析,在构建c的过程中,目的基因用________进行了切割。检验重组载体导入能否成功需要利用______________作为标记基因。 (4)过程d可以采用的方法是__________。要想得到个体,还必须利用的技术是__________ * 链接高考——基因工程 1.镰刀型细胞贫血症的病因是血红蛋白基因的碱基序列发生了改变。检测这种碱基序列改变必须使用的酶是 A.解旋酶 B.DNA连接酶 C.限制性内切酶 D.RNA聚合酶2.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,下列操作错误的是 A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C.将重组DNA分子导入烟草原生质体 D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 3.天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列操作正确的是 A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA,再扩增基因B B.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B C.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞 D.将基因B直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞 答案:1. C 2. A 3.A 真题测试 偏难题 基因工程的相关概念及操作要领 6(选择题) 6分 2012 偏难题 基因工程的原理和技术 6(选择题) 6分 2011 中等偏易题 基因工程的全过程 2(选择题) 6分 2010年 难易程度 考察内容 题号 分值 年 历年高考理科综合浙江卷基因工程内容分布 如何保证高准确性和得分率呢? 充分把握书本知识并作适当扩展。 各地历年高考理科综合中基因工程的分布 热点预测:预计2013年高考对本专题的考察仍将以基因工程工具 的性质和运用以及基因工程的操作过程和应用为主。 题型主要为选择题,但不能排除非选择题的可能性 考点一 DNA重组技术的基本工具 考情解读 三种基本工具的作用涉及基因工程操作程序的关键步骤,近几年高考考查的频率较高,考查内容包括工具酶类型、实质及作用,运载体作用及特点等,预计2013年高考仍可能对各类型操作工具的作用及特点结合图形予以考查。 作用部位 作用特点 作用结果 种类项目 限制酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 解旋酶 作用底物 DNA 分子 脱氧核苷酸 DNA分子片段 DNA分子 碱基对间的氢键 磷酸二酯键 磷酸二酯键 磷酸二酯键 将DNA分子两条链之间的氢键打开 只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上 将互补的双链DNA分子片段连接磷酸二酯键 能识别并切割双链DNA分子内一小段特殊核苷酸序列 分成两条单链DNA分子 形成新的DNA分子 形成重组DNA分子 形成黏性末端或平末端 探究点一 与基因工程相关的几种酶 注意点: 限制性核酸内切酶:能识别双链DNA分子的某种特定核苷 酸序列,并在特定位点上断开磷酸二酯键 (特异性识别、切断DNA)。 DNA连接酶:连接被限制酶切开的磷酸二酯键。 只要末端能互补连接即可,不一定是由同种酶切割而来 (无特异性) 1.某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp),先用限制酶a切割, 再把得到的产物用限制酶b切割,得到的DNA片段大小如下表。 限制酶a和b的识别序列和切割位点如下图所示。下列有关说法 不正确的是 A.在该DNA分子中,a酶与b酶的识别序列分别有3个和2个 B.a酶与b酶切出的粘性末端不能相互连接 C.a酶与b酶切断的化学键相同 D.用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接 操作,若干循环后,序列会明显增多 B 经典例题 1. 下面是4种限制性核酸内切酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图 (↓表示剪切点、切出的断面为粘性末端):限制酶1:——↓GATC——; 限制酶2:——CATG↓——;限制酶3:——G↓GATCC—;限制酶4:——CCGC↓GG——。请指出下列哪项表达正确A.限制性核酸内切酶2和4识别的序列都包含4个碱基对B.限制性核酸内切酶1和3剪出的粘性末
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