草履虫培养实验报告.doc

培养草履虫 实验目的：分别用配置的5种培养液培养草履虫，以探索培养草履虫适宜的条件 实验材料：烧杯、试管、解剖针、电池、载玻片、显微镜、血球计数板。 实验内容：分为草履虫的采集、纯化、培养等几部分。 草履虫的采集 1.1 水温较高时草履虫的采集 在气候温暖的季节，可以到水沟、池塘采集草履虫。在采集时要选择枯枝落叶多的地方，用清洁的试管、小广口瓶或小烧杯沿水面采集池水。向光观察，如果发现其中有针尖大小的小白点在游动，则可能是草履虫；或者在比较肥沃、水不太流动、沟水较浅、淤泥黑色的污水沟、河沟或池塘里。用器皿轻轻刮取泥表乳白色的薄膜。连同少许的水放于瓶中。即可采集到草履虫。 1.2 水温较低时草履虫的采集 一般认为采集草履虫都在夏季进行。但有人认为夏季水温高，适宜草履虫生活，草履虫在水中活动频繁，不易采集。冬天水温低，草履虫不会自由流动，而且缩成一团沉于水底，这时采集可以防止以上不利条件。采集时可以用小铁锤在冰层上打开一个小洞，由于冰下压强大于冰上压强，使水向上喷，水下球状的草履虫包囊(草履虫在低温等不适环境中便形成包囊)也随水喷出，这时用清洁的试管、小广口瓶或小烧杯采集水样则很容易得到球状的草履虫。采集回来以后放在20℃左右的环境下培养。 草履虫的纯化 牛肉汁、电场分离纯化培养法: 草履虫对牛肉汁的敏感性很强，但单纯的使用牛肉汁，分离速度较慢；草履虫在电场中有向阴极的应激性，即当直流电通过其培养液时，草履虫会向阴极快速游动，其安全电压为4~ 12伏。在牛肉汁和电极的双重刺激下，分离会快速有效地进行。具体操作如下：取新鲜牛肉50 g，加水1000 mL，煮沸1 h后，以纱布过滤，取上清液，放凉备用，即为牛肉汁。分离时取载玻片平放于解剖镜的载物台上，用微吸管吸取牛肉汁一滴滴于载玻片一端，吸取待分离的培养液一滴，滴于载玻片另一端，两滴间距2 cm左右。用解剖针从肉汁一端划一条引渡线到含有草履虫的水滴上。设置6伏直流电(采用干电池较好)，负极放于牛肉汁上正极放于待分离液中，如图8所示。镜检，可观察到草履虫很快经引渡线到牛肉汁一端。待草履虫聚集较多时，用纱布切断引渡线擦去分离液。用干净滴管把含草履虫的牛肉汁吹入以上分装的培养液中。如此重复操作几次，然后将培养液放在20℃ 温度下继续培养5~ 7天，就会有大量草履虫繁殖出来。 培养草履虫 3.1五种培养液的配置 3.1.1稻草培养液：取新鲜洁净的稻草去掉上端和基部的几节剪成2．0～3．0厘米长的小段，按1克稻草／100毫升水的比例放人烧杯中煮沸10分钟并用蒸馏水补足蒸发掉的水分。盖上双层纱布于烧杯口上放置24小时即可接种草履虫。盖上双层纱布的目的是使空气中的细菌可以进人培养液而其它生物不能进入故不用玻璃盖。 3.1.2麦粒液培养液的制备：按5克麦粒／1000毫升水的比例加入烧杯中煮到麦粒裂开用蒸馏水补足蒸发掉的水分。盖上双层纱布于烧杯口上放置24小时即可用于接种草履虫。 3.1.3玉米粒培养液：称取15g玉米粒放入容器中加1 000mL蒸馏水，煮沸15 min冷却、过滤、定容后分装制成浓度为1. 5%的玉米粒培养液备用。 3.1.4 酵母片培养：称取干酵母2 g放入容器中加1000mL蒸馏水，摇荡均匀使其充分溶解，定容后分装制成浓度为0. 2%的酵母培养液备用。 3.1.5熟鸡蛋黄培养液：称取0. 2 g熟鸡蛋黄，磨碎放入容器中加60 mL蒸馏水，摇荡均匀使其充分溶解，定容后分装备用。 3.2其他培养条件 草履虫能否大量繁殖取决于它的生活环境是否适宜。以上培养液无论煮沸与否均要放进恒温箱中在25℃ ~ 30℃ 下培养1~ 2 天，目的是促使培养液长出细菌以便接种草履虫后供草履虫索饵。同时草履虫在相当大的pH范围内（5.0~10.0）均能正常生长，最适生长繁殖pH 值是7. 0左右因此在培养液制备时要调整PH 值使其在适宜生长范围内。另外,适宜个体生长和繁殖的条件也有差异。 3.3记录数据 培养过程中，每天定时计录5种培养液中草履虫的密度。 实验结果：五种培养液中草履虫密度测定 单位（ 个/ml） 麦粒液培养液 玉米粒培养液 酵母片培养 熟鸡蛋黄培养液 西瓜皮培养液 第一天 第二天 第三天 第四天 第五天 第六天 第七天 分析：