离子色谱-脉冲安培检测法测定双黄连注射液中葡萄糖果糖及蔗糖的含量.docVIP

离子色谱-脉冲安培检测法测定双黄连注射液中葡萄糖、果糖及蔗糖的含量 摘要：本文建立了离子色谱法测定双黄连注射液中单糖含量测定的方法。样品稀释后，使用戴安CarboPac PA20分析柱分离，流动相为氢氧化钠溶液梯度淋洗，流速0.5mL/min，脉冲安培检测。本方法简便快捷,用于测定双黄连注射液中糖类物质的含量,具有较高的灵敏度。 关键词 双黄连注射液 糖 离子色谱法 安培检测器 双黄连注射液是中药金银花、黄芩、连翘的提取物制剂,有广谱抗菌、抗病毒的作用 ,对呼吸道疾病具有疗效确切、使用安全、无耐药性等优点。【1】但随着应用的增多 ,也出现 了一些过敏反应。双黄连口服液中，绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩素是其主要活性成分。 此外，双黄连注射液中还含有多种糖类物质。对双黄连注射液成分的全面研究，有助于优化 工艺，提高疗效，降低不良反应的发生率。 离子色谱法与脉冲安培检测器联用（HPAEC-PAD），是近年来发展起来的检测糖类物质的方法。该方法具有样品前处理简单，不需衍生，灵敏度高，分离度好等优点，广泛应用于食品、生物样品中糖类物质的检测。本文建立了离子色谱法测定双黄连注射液中糖类物质含量的方法。通过样品前处理方法和色谱条件的优化，建立了一种较为完善的分离和检验方法，可检测出注射液中低含量的糖类物质。 1.仪器及色谱条件 1.1 仪器 Dionex ICS3000型离子色谱仪，Dionex CarboPac PA20分析柱及保护柱。 1.2 样品前处理 取双黄连注射液，稀释500倍后，过0.22μm滤膜和Dionex RP柱。 1.3 色谱条件 流动相：0-10min，23mM NaOH；10.1-15min，200 mM NaOH；15.1-20min，23 mM NaOH；流速：0.5mL/min；柱温：30℃；检测波形：标准糖四电位波形。 2. 结果与讨论 2.1 样品前处理 双黄连注射液成分复杂，除含有绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩素等物质外，还含有大分子物质。如去除不彻底，容易降低柱效，造成分离度下降、保留时间缩短。Dionex RP柱，可有效去除样品中的杂质，延长色谱柱寿命，保证实验重现性良好。 2.2 色谱柱的选择 糖为多羟基化合物，具有弱酸性，在碱性溶液中部分电离，成为阴离子，从而在强阴离子柱上有所保留。根据这一性质，不同Pka的糖在色谱柱上有不同的保留，从而使不同结构的糖得以分离。双黄连注射液中含有的糖类物质主要有葡萄糖、果糖和蔗糖，这三种糖在Dionex CarboPac PA20色谱柱上有很好的分离。分离色谱图如图1所示。 图1 双黄连注射液中葡萄糖、果糖、蔗糖含量测定色谱图 3. 结论 该方法准确度、精密度均较高,且操作简便,适合于双黄连注射液中葡萄糖、果糖及蔗糖的测定。 参考文献 1.梁建成,黄义昆,谢玲,等. 高效液相色谱法同时测定注射用双黄连中绿原酸、连翘苷、黄芩苷的含量。中国药师,2008, 11( 11):1386