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从土壤中分离纯培养微生物并作初步观察鉴定 笑嘻嘻 （闽南师范大学生科院食品质量与安全14级 363000） 摘要及一系列的生理生化对照种属特征纯化的关键词ISOLATED FROM SOIL MICROBIAL AND PURE TRAINING PRELIMINARY OBSERVATION APPRAISAL EXPERIMENT REPORT 笑嘻嘻 (Food?quality and safety of?Fujian Normal?University?academy?14 363000)Abstract:skilled purification microbial the basic operation of the technology, and the soil of the microbial separation and purification, according to the colony morphology observation and a series of physiological and biochemical results, the comparison species features of separation and purification preliminary identification of microbial subordinate groups. Key Words:bacteria，mould， Actinomyces， Culture medium preparation，High-pressure steam sterilization，Dry heat sterilization ，Flat crossed， Cant vaccination 生活中的微生物无处不在，某些微生物给人们带来困扰，但更多的微生物对我们人类有必不可少的作用。为了生产和科研的需要，人们往往需要从自然界混杂的微生物群体中分离出具有特殊功能的纯种微生物；或重新分离被其他微生物污染或因自发突变而丧失原有优良性状的菌株；或通过诱变及遗传改造后选出优良性状的突变株及重组株。这种获得单一菌株纯培养的方法称为微生物的分离纯化技术。纯培养是指一株菌种或一个培养物中所有的细胞或孢子都是由一个细胞分裂、繁殖而产生的后代。分离纯化技术主要由采集样品、培养、纯种分离和性能测定等几个基本环节组成。 材料与方法 2、pH调节、分装、包扎及无菌检查同牛肉膏蛋白胨培养基配制。 （三）马丁氏培养基的配制 马丁氏培养基是用于分离真菌的选择培养基。其配方如下： K2HPO4 1g， MgSO4.7H2O 0.5g, 蛋白胨5g, 葡萄糖10g, 琼脂15~20g, 水1000ml，自然pH 1、称量和溶解 先计算后称量，按用量称取各成分，并将其溶解在少于所需量的水中。待各成分溶解后，补充水分到所需体积。再将孟加拉红配成1%的水溶液，在1000mL培养液中加入以上孟加拉红溶液3.3ml,混匀后,再加入琼脂加热融化,方法同(一). 2、pH调节、分装、包扎、灭菌及无菌检查同（一）。 3、氯霉素的加入 氯霉素受热容易分解，所以临用时，将培养基融化待温度降至45oC左右时才能加入。可先将氯霉素配成1%的溶液（配好的氯霉素溶液保存于-20oC），在100ml培养基中加入1%氯霉素0.3ml，使每毫升培养基中含氯霉素30μg。 土样 取自闽南师范大学瑞京公寓芒果树，地下10cm~15cm 消毒和灭菌 高压蒸汽灭菌 I 自动立式压力蒸汽灭菌器的操作步骤 I-1 装料 开盖，把包扎好的灭菌物品放在灭菌桶内的筛板上，灭菌包体积一般不超过20cmX10cmX10cm为宜，各包之间留有间隙，以利于蒸汽穿透。在堆放灭菌包时应注意安全阀、放汽阀孔位置必须留出空位，保障其畅通放汽，否则因安全阀出气孔堵塞不能工作造成事故。 I-2 开机 I-2-1 加水：接上本机标牌一致的电源，将控制面板上电源开关按至ON处，此时断水灯（黄色）亮，显示电源已正常输入。低水位灯（红色）亮，显示蒸发锅内处断水状态，然后将灭菌桶盖罩住灭菌桶，把生活用水从灭菌桶与蒸锅夹缝内加入，当水位达到高水位时，以上两灯同时灭。此时，应继续加水到高水位灯（绿色）亮时停止。 I-2-2 设定温度：数显窗内，红色数显为灭菌桶内温度，绿色数显为设定温度。按动控制板上增加键或减少键，可在绿色数显上设定所需温度，按动位移键可将闪烁的绿灯数显进位移位设定，当每次所需温度结束时，须按一下确认键进行确认，即可完成设定。此时，红色数显随着蒸发锅内温度上升而变化。 I-2-3 设定时间：温度设定完毕并按确认键后，绿色数显切换成定时状态，按位移键定位，然后再按增加键和减少键，设定所需的保