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【解析】(1)蛋白质工程首先要根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行分子设计,因此,图中构建新的胰岛素模型的主要依据是预期胰岛素的功能,即速效胰岛素的功能。 (2)合成的目的基因应与载体结合,构建基因表达载体后导入受体细胞中才能表达。 (3)利用蛋白质工程生产速效胰岛素,需合成新的胰岛素基因,改造好的目的基因需要通过基因工程转入受体细胞,并在生产中要借助工程菌,所以还需要发酵过程,因此,此过程涉及蛋白质工程、基因工程和发酵工程。 (4)由新的蛋白质模型到构建新的基因,其基本思路是:根据新的胰岛素模型中氨基酸的序列,推测出其基因中的脱氧核苷酸序列,然后利用DNA合成仪来合成出新的胰岛素基因。 答案:(1)预期胰岛素的功能 (2)载体 受体细胞 (3)蛋白质工程 基因工程 (4)根据新的胰岛素模型中氨基酸的序列,推测出其基因中的脱氧核苷酸序列,然后利用DNA合成仪来合成出新的胰岛素基因 1.(2013·漳州模拟)下图为利用生物技术获得生物新品种的过程,据图回答: (1)在基因工程中,A→B为 技术,利用的原理是 。 (2)B→C为抗虫棉的培育过程,其中以苏云金芽孢杆菌的_____ 作为目的基因,③过程常用的方法是 。要确定目的基因导入受体细胞后是否能稳定遗传并表达,需进行检测和鉴定。请写出在个体生物学水平上的鉴定方法: 。 【解析】(1)根据图示过程中温度变化及引物的存在,判断A→B为PCR技术,利用的是DNA双链复制的原理。 (2)生产抗虫棉所用基因为Bt毒蛋白基因;将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法;在个体水平检测目的基因是否表达的方法就是对棉花进行抗虫检测,观察其是否具有抗虫性状。 答案:(1)PCR DNA双链复制 (2)Bt毒蛋白基因 农杆菌转化法 让害虫吞食转基因棉花的叶子,观察害虫的存活情况,以确定抗虫棉是否具有抗虫性状 2.(2012·新课标全国卷)根据基因工程的有关知识,回答下列问题: (1)限制性核酸内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有 和 。 (2)质粒载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下: AATTC……G G……CTTAA 为使载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性核酸内切酶切割,该酶必须具有的特点是 。 (3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即 DNA连接酶和 DNA连接酶。 (4)反转录作用的模板是 ,产物是 。若要在 体外获得大量反转录产物,常采用 技术。 (5)基因工程中除质粒外, 和 也可作为载体。 (6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未 处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是 。 【解题指南】解答本题需掌握以下关键点: (1)限制性核酸内切酶的作用和特点。 (2)DNA连接酶的种类。 (3)载体的类型。 (4)受体细胞的选择原理。 【解析】(1)当限制性核酸内切酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端,而当限制性核酸内切酶在它识别序列的中心轴线处切开时,产生的是平末端。 (2)为使载体与目的基因相连,不同的限制性核酸内切酶应该切出相同的黏性末端。 (3)DNA连接酶根据其来源的不同可分为两类,一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为E·coliDNA连接酶,另一类是从T4噬菌体中分离出来的,称为T4DNA连接酶。 (4)反转录是指以RNA为模板在逆转录酶的作用下合成DNA的过程,可以在体外短时间内大量扩增DNA的技术叫PCR(聚合酶链式反应)。 (5)基因工程中可以作为载体的除质粒外,还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 (6)大肠杆菌细胞有细胞壁和细胞膜,能阻止质粒(外源DNA)等物质的进入,只能通过Ca2+处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为感受态细胞)才能作为受体细胞。 答案:(1)4 质粒—质粒连接物 目的基因—目的基因连接物 质粒—目的基因连接物 (2)EcoRⅠ SmaⅠ 考点二 基因工程的基本操作程序和应用? 1.基因工程的基本操作程序 (1)目的基因的获取: ②人工化学合成:适用于分子较小的基因。 (2)基因表达载体的构建: ②基因表达载体的构建步骤: (3)将目的基因导入受体细胞: Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子 将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 将
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