-学高中生物专题一第2节基因工程的基本操作程序课件新人教版选修3摘要.ppt

①农杆菌转化法：目的基因插入Ti质粒的TDNA→农杆菌→导入植物细胞→稳定维持和表达 ②基因枪法：是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高 ③花粉管通道法：这是我国科学独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法 植物细胞 (体细胞) 方法 受体 细胞 知识梳理 典例剖析 栏目链接 Ca2＋处理细胞→感受态细胞→表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子→目的基因随受体细胞的繁殖而复制 微生物 细胞(原 核细胞) 显微注射法：含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物 动物细胞 (受精卵) 知识梳理 典例剖析 栏目链接 例3下列关于目的基因导入受体细胞的描述不正确的是(　　) A．基因枪法导入植物体细胞的方法比较经济有效 B．显微注射技术是转基因动物中采用最多的方法 C．大肠杆菌最常用的转化方法是使细胞的生理状态发生改变 D．农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法 知识梳理 典例剖析 栏目链接 解析：不同生物目的基因导入的方法不同，每种方法都有利有弊。目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法，该方法比较经济有效，还有基因枪法和花粉管通道法；目的基因导入动物细胞常用的方法是显微注射法；大肠杆菌细胞最常用的转化方法就是用钙离子处理细胞，使细胞的生理状态发生改变，完成转化过程。 答案：A 知识梳理 典例剖析 栏目链接 3．采用基因工程方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是(　　) ①将毒素蛋白质注射到棉花受精卵中　②将编码毒素蛋白的DNA序列注射到受精卵中　③将编码毒素蛋白质的DNA序列与质粒重组，导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞再进行组织培养　④将编码毒素蛋白质DNA序列与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵 变 式 迁 移 知识梳理 典例剖析 栏目链接 A．①② B．②③ C．③④ D．①④ 变 式 迁 移 解析：目的基因导入受体细胞后，使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用，必须构建表达载体。 知识梳理 典例剖析 栏目链接 变 式 迁 移 因为基因表达载体组成除目的基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因，有了启动子才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质；有了终止子才能保证转录在所需的地方停下来；具有标记基因是为了鉴别受体细胞中是否含目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。只有构建表达载体才能有利于基因表达，有利于筛选，也能更好地增强目的基因的表达水平。如果不构建表达载体，即使导入目的基因也不能稳定遗传。所以不能直接注射。 答案：C 知识梳理 典例剖析 栏目链接 变 式 迁 移 点评：(1)农杆菌转化法中有二次拼接和二次导入。第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒上TDNA的中间部位，第二次拼接(非人工操作)指被插入目的基因的TDNA被拼接到受体细胞的染色体DNA上；第一次导入是将含目的基因的Ti质粒重新导入农杆菌，第二次导入(非人工操作)是指含目的基因的TDNA进入受体细胞。 知识梳理 典例剖析 栏目链接 变 式 迁 移 (2)因为动物体细胞的全能性受到一定限制，故一般将目的基因导入动物的受精卵或卵细胞，而不是体细胞；而植物体细胞的全能性相对容易表达，故一般将目的基因导入植物的体细胞，然后再通过植物组织培养技术获得转基因植株。 知识梳理 典例剖析 栏目链接 知识点4 目的基因的检测与鉴定 原因：一是目的基因导入受体细胞的成功率很低；二是即使目的基因已导入受体细胞，但在受体细胞中成功表达的概率也很低，故最后需要从分子水平、个体水平等方面进行目的基因的检测与鉴定。 知识梳理 典例剖析 栏目链接 需要做抗虫、抗病的接种实验，以确定是否有抗性以及抗性的程度；基因工程产品与天然产品的活性比较，以确定二者的功能活性是否相同等 个体 水平 鉴定 同上 抗原—抗体杂交 目的基因是否翻译出蛋白质 第三步 同上 分子杂交技术(DNA和mRNA之间) 目的基因是否转录出mRNA 第二步 是否成功显示出杂交带 DNA分子杂交(DNA和DNA之间) 目的基因是否进入受体细胞 第一步 分子 水平 检测 结果显示 方法 检测内容 步骤 类型 知