抵抗素在非酒精脂肪性肝炎发病机制中的作用.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………．．1 英文摘要……………………………………………………………………．．4 研究论文抵抗素在非酒精性脂肪性肝炎发病机制中的作用 前言……………………………………………………………………．．8日IJ舌……………………………………………………………………．．8 材料与方法……………………………………………………………．．9 结果……………………………………………………………………11 附图、附表……………………………………………………………13 讨{仑……………………………………………………………………25 结论……………………………………………………………………31 参考文献………………………………………………………………32 综述肝脏——一个新的免疫器官……………………………………35 致谢……………………………………………………………………44 个人简历……………………………………………………………………45 中文摘要 抵抗素在非酒精性脂肪性肝炎发病机制中的作用 摘 要 目的：非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic 以肝实质细胞脂肪沉积和肝小叶内炎症为特征的慢性肝脏疾病，与肥胖、 高血糖症、高脂血症、高血压等胰岛素抵抗相关性疾病并存。抵抗素 其机制可能与抑制腺苷酸活化蛋白激酶(AMP．activatedkinase， protein AMPK)磷酸化、促进炎症因子的活化有关。研究非酒精性脂肪性肝炎 发展的不同阶段大鼠肝组织抵抗素与AMPK的表达情况及血清抵抗素 的表达水平及其与肝组织病理变化(脂肪变性、炎症、纤维化)、肿瘤 necrosis 坏死因子0【(rumor factora，n师O【)水平等的关系，揭示抵抗素 在NASH发病机制中的作用及地位，为NASH的预防及治疗提供新的靶 点。 模型组(30只)。正常对照组给予标准饲料喂养，模型组予以高脂饮食 喂养(标准饲料加2％胆固醇、10％猪油和5％玉米油)。分别于8、12、 16周经股动脉放血处死，组织学染色证明NASH造模成功。 留取血清，做血清生化指标、TNFQ和抵抗素水平监测。留取肝右 叶组织分为四部分，一部分用于快速冰冻切片，行SudanlV染色；一部 染色；一部分用4％多聚甲醛固定用于抵抗素免疫组化染色；其余肝组 Western 织经液氮速冻后置于．80。C冰箱， blot方法测定肝组织AMPKa 的活性。 AU2700全自动生化分析仪检测血清胆固醇 用日本Olympus 酶(alanine immunosorbent 观察肝组织普通病理变化；Masson染色观察肝组织纤维化的程度； ● ． 中文摘要 SudanIV染色，观察肝细胞脂变程度；采用PowerVisionⅢ二步法对肝组 织进行抵抗素免疫组化染色。用多功能病理图象分析仪测定抵抗素表达 面积百分比，每张片子取中央和四周五个区域，20倍物镜下计算平均面 密度(阳性面积与统计场面积百分比)。采用Westernblot方法测定肝 P—AMPKa／AMPKa比值代表AMPKa的活性。 应用SPSS 13．0统计软件分析实验数据。 结果： 1大鼠的一般情况：随着造模时间的延长，正常对照组大鼠食欲佳， 皮毛光滑，精神状态好，体重逐渐增加。模型组大鼠自造模开始至12 周食欲亦佳，皮毛亦光滑，体重增加明显快于正常对照组，但在造模12 周后逐渐精神萎靡，食欲减退，皮毛欠光滑，体重停滞不增。 (P0．01)。 3肝组织病理学变化：肉眼下，正常对照组大鼠肝脏呈红褐色，明 亮有光泽