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抗DNA抗体蛋涂层支架携带质粒介导一氧化氮合酶基因转染小型猪冠状动脉的可行性研究
缩略语表 缩略语 中文 英文 №S 一氧他氮会酶 舔tfic0xide sy魏臻辐e cNOS 结构型～氧化氮合酶 constitutivc Ⅻtric0xide S辩融ase eNOs 内皮型一氧化氮合酶 EndottlelialNit“c Oxide S强穗鑫瓣 iNOS 诱导型一氧化氮合酶InducibleNitricoxide Sy丑th矬se 淤『。S 神经型一氧佬氮台酶 Neuronal Ni嘶e 0xidG S蹦hase C黪 光密度G}p蠢酬粉隧si移 pBS 磷酸缓冲液 Bu虢rS矬1jne Phosphate 残漾 Q嬷n鬏艨醣髓 多聚酶联反盎P文ymerase pTCA 经皮冠状动脉球囊成形Percutaneous nallsluminal 术c∞nary A蕾誊婶la潍 RNase心渔酶 Ribonuclease 鬏N黼趣熏缀珊俄酶搀螯|蘩 R蕊ombi矬鑫越Ri婚n挂elease 111llibitor 雌pCR 反转录一彩浆酶联反戚 pCR Re珊rse戡鞠script SPDP N-琥珀酰驻胺一3-(2-避乏n．Succ．{nimdyl 3．(2。 啶基二硫)代丙酸醚p如dyldl慨o)p”opmate 力，使iNoS基因的转染效率提高，从而提高其防治再狭窄的治疗效 果。 本课题是该系列研究的第一阶段，主要探索抗DNA抗体蛋白涂层 支架携带质粒介导一氧化氮合酶基因转染小型猪冠状动脉的可行性。 实验利用sPDP的双官能团特性，以其为偶联剂以共价键连接抗 DNA抗体与支架的胶原蛋白涂层，再利用抗DNA抗体与质粒DNA的相 互作用实现将质粒固定于蛋白涂层支架上的目的。携带质粒的抗DNA 抗体蛋白涂层支架制备完成后，以常规支架置入技术置入小型猪冠状 动脉内7曰，以实验其转染能力。 本实验共分两部分。 第一部分选用pEGFP—C1质粒(携带绿色萤光蛋白基因)。支架 置入术后7日，收集支架段血管和支架下游血管，冰冻切片后于荧光 显微镜下观察。结果表明大量绿色荧光颗粒散布于支架段冠状动脉内 弹力板旁和血管壁中层内侧1／2，说明抗DNA抗体蛋白涂层支架可以 携带质粒介导基因转染小型猪冠状动脉，且其转染深度可达血管壁中 层内侧1／2。 第二部分选用pcDNA3．1．iNOS质粒(携带一氧化氮合酶基因)。 支架置入术后7日，收集支架段血管以及支架段下游lcm处血管、 支架段血管周围心肌、肺、肝和肾组织，送R1二PCR实验。结果表明 支架段血管壁内有一氧化氮合酶基因表达，而对照组及支架段下游 1cm处血管、支架段血管周围心肌以及肺、肝和肾内内无该基因表达。 说明抗DNA抗体蛋
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