奶粉中磷脂酰胆分子种类检测方法的研究.pdf

摘 要 摘 要 卵磷脂是生命的基础物质。由丁．卵磷脂适合各个年龄的人群，尤其是儿童、孕妇和老人， 把卵磷脂应用到奶粉中，方便人们补充卵磷脂，尤其是对’『．饮食单一的儿童，更适合通过奶 粉的渠道补充卵磷脂。冈为卵磷脂在食品中是以一种食品添加剂的形式存在的，喷涂丁奶粉 时，卵磷脂的川量要求IIl‘奶粉总干物质的0．2％．0．3％左右，一般的允许添加量在0．4％以_卜．。所 以建立一种灵敏、有效、快速的检测奶粉中卵磷脂含量的分析方法对丁．保障食品安全具有重 要的意义。 现在关丁．卵磷脂的研究人多数都是从人豆或蛋黄中提取出来，然后进行纯化，再进行检 测分析，但是人多数的检测方法只能分离开磷脂酰胆碱、磷J||旨酰乙醇胺等J’义上的卵磷脂， 却不能分开狭义上的卵磷脂，也就是磷脂酰H日碱，实际上，由丁．甘油磷脂分子的sn—l和sn一2 位上是由各种组合的大然脂肪酸酯化而成，所以磷脂酰胆碱一般是代表着一族的分子形式。 文中通过气相色谱分析磷脂酰胆碱脂肪酸种类的手段建立了超高效液相色谱一质谱联刚 检测磷脂酰胆碱分子种类的方法。通过两种不同的甲酯化方法进行对比，川气相分析，以响 应值的人小作为参数，挑选出适合磷脂酰胆碱的方法，川—『．气相分析，最后采用碱催化法进 行甲酯化。 使用质谱检测器，通过反复研究发现不同的磷片旨酰胆碱具有共同的子离子片段，分别为 184．1和125，相应的碰撞电乐分别为35v和80v，根据磷脂酰H日碱的结构分析，可知断裂的 两个片段都在它的特征基团上，是所有的磷脂酰胆碱共有的部分，这一信息为我们检测磷脂 酰片目碱提供了一个强有力的依据，如果这个推断成立就能刖质谱检测每一种磷脂酰鹏碱分子。 采川C18柱，根据单冈素实验分析，试验不同的流动相配比，选择出灵敏度、分离度效果好 的流动相，最后选择使川乙腈一甲醇(5：5，v／v)作为流动相，进行等度洗脱。弱洗液应该与 流动相保持一致，冈为弱洗液会进入系统，与流动相不同会影响实验结果。优化出的方法能 同时检测出混合物的多种组分，并进行定性和定量，测得的结果线性良好，检出限为1嵋几， 线性范嗣lo~1000ug／L(R=0．99936)，所有的磷脂酰胆碱的保留时间都在5min以内。 分析研究了高效液相色谱．紫外检测的方法，使川C18枉进行分析，通过不同的磷脂酰胆 碱的单标检测，发现紫外检测器无法将两种单标分离开，具有相同的保留时间，也无法分离 混合的磷胎酰胆碱标准。W．，改变流动相，也不能使之分离，但是HPLC—uV能很好的检测出 磷脂酰胆碱的总含量，经过研究得到的最适流动相为止己烷一异丙醇一水(31／62／7，v／v／v)，波 K为205nm，检出限为0．1mg／mL，线性范嗣0．5～50mg／L(R=0．9967)。 文中还研究了奶粉中磷脂酰胆碱的提取方法，分别选用罗兹法和氯仿．甲醇法提取奶粉中 的脂肪，通过实验可知，罗兹法和氯仿．甲醇(2：1，v／V)法都适合提取奶粉中的脂肪，得到 的脂肪含量基本相同，但是氯仿一甲醇法更适合丁．高结合脂含量的样品，尤其是磷脂含量高的 样晶，所以最终选川氯仿．甲醇法。提取的脂肪川丙酮进行洗涤，除去其中含有的其他油脂和 杂质，再用乙醇提取磷脂酰胆碱，近一步纯化磷脂酰胆碱，川甲醇作为样品的稀释荆，得到 的溶液用丁．检测分析。通过实验，得出的具体结论是：在室温卜．，川丙酮洗涤提取后的脂肪 4次，再使川40。C的乙醇洗涤磷脂酰胆碱，反复4次，进一步纯化磷脂酰胆碱。 东北农业人学T学硕J．学位论文 关键词：奶粉；磷脂酰胆碱；超高效液相色谱一质谱；气相色谱 摘 要 Methodof onDetection Research inMilkPowder Molecular Species Abstract materialof fortheall of Lecithinisthebasis life，suitable children，