药理学I实验指导.docVIP

《药理学Ⅰ》实验指导 一、实验内容 在网络课件中所给的九个具体实验中，至少完成其中《有机磷酸酯类中毒及解救》，其它为选做实验；同时需完成实验动物基本操作、抗癫痫药物、抗帕金森药物、糖皮质激素等录像内容的学习。 二、实验要求 （一）理论部分 了解实验原理，熟悉加入试药试液的作用，掌握药理学实验基本知识和技能。 （二）实验部分 1．原始记录 实验中要仔细观察，如实记录实验现象。实验记录要真实、准确、清晰、完整，不得随意涂改数据。内容包括：实验名称、实验室温度、相对湿度、所用仪器和试剂、供试品和试药试液取用量、实验方法步骤、观察到的现象、结果处理等。 2．实验报告 每次实验完成后，要求写出实验报告。实验报告要求文字清楚整齐，语言简洁扼要。报告的内容包括：实验名称、实验目的、动物品系名称及性别、方法原理、实验步骤（可用流程示意图，要求简明扼要）、原始数据和现象记录、计算结果、结论（简明扼要）、讨论（用所学理论知识对实验现象和结果的分析和解释、对所做实验的小结、改进意见等）。 注：实验成绩占课程总成绩的20%。 实验报告格式请到：网院主页-教学服务-教务表格中下载。 实验一 有机磷酸酯类中毒及其解救 【实验目的】 1．观察有机磷农药的毒性作用及中毒症状； 2．掌握有机磷农药中毒的解救方法及原理。 【相关理论】实验器材【思考题】【实验目的】了解磺胺类药物在动物体内随时间变化的代谢规律，并掌握药代动力学参数的计算方法。【相关理论】磺胺类药物能与某些试剂发生反应生成有色物质，通过比色可以对其血浓度进行定量检测。酸性环境下，磺胺类药物的苯环上的氨基（-NH2）离子化生成铵类（-NH3+）化合物，与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成重氮盐（-N=N+-）。对这种化合物在525nm波长下测定其吸光度（OD），其OD值与磺胺类药物的浓度呈正比。【实验动物】家兔，3kg左右。【药品】7.5%三氯醋酸，0.5%亚硝酸钠，0.5%麝香草酚，0.1%磺胺嘧啶，肝素等。 【实验器材】兔台，手术器械一套，动脉插管，动脉夹，离心管10只，试管10只，小烧杯（10ml）10只，移液管（0.2ml，1ml，5ml，10ml）等，离心机，振荡器，分光光度计等。【实验方法】1． 家兔麻醉后，分离颈动脉。耳缘静脉注射肝素抗凝后，颈动脉插管，备取动脉血用。2． 取血：取空白血样。然后对家兔耳缘静脉注射磺胺嘧啶（SD，0.3g/kg），分别于注射后0、3、5、15、30、45、60、90min时取动脉血。3． 测定血药浓度：严格按照下表中的顺序加药：【计算】根据标准管的药物浓度及其光密度值，可计算出样品管内的药物浓度。公式如下： 试管编号时间（min）7.5%三氯醋酸（ml）血样（ml）蒸馏水（ml）0.5%亚硝酸钠(ml)，摇匀0.5%麝香草酚（ml），摇匀对照管给药前立即摇匀，振荡器振荡2min0.1 充分摇匀，2000转/分，离心5分钟；取上清液1.5ml，移至另一相应的试管中；525nm波长下测量光密度标准管给药前标准液0.1ml0 2.8 0.1 0.1 0.5 1 3 2.8 0.1 0.1 0.5 1 5 2.8 0.1 0.1 0.5 1 15 2.8 0.1 0.1 0.5 1 30 2.8 0.1 0.1 0.5 1 45 2.8 0.1 0.1 0.5 1 60 2.8 0.1 0.1 0.5 1 90 2.8 0.1 0.1 0.5 1 【曲线拟合】将所测得的血药浓度值与时间通过计算机进行曲线拟合，得到药时曲线，表达公式如下：Ct = Ae-αt + Be-βt其中，Ct：时间t后的血药浓度A：分布开始时的血药浓度；：分布速率常数；B：消除开始时的血药浓度；：消除速率常数。【作图】在半对数坐标纸上以时间（t）为横坐标，实测的光密度值换算而得的血药浓度的对数为纵坐标，绘出时量曲线图。【分析讨论】根据所得到的药时曲线讨论SD的药代动力学特点。注意事项加取血样的吸量管为同一只，因此应先取空白血样，分别加到对照管和标准管中后，再从注射后90min时的血样开始取起，然后是注射后60、45、30、15、5、3、0min的血样。．每只试管内，先加三氯醋酸，再向此三氯醋酸内加入血样，加完血样后立即振荡，否则会很快发生凝固，影响结果的准确性。．显色剂的顺序一定不能错，。．SD的血药浓度单位为mg/ml。【思考题】1．一级代谢动力学与零级代谢动力学各有什么特点？2．什么是房室模型？根据本实验的结果，判断磺胺嘧啶在家兔体内的房室模型属于哪一类。 实验：小鼠腹腔注射筒箭毒碱ED50的测定Determination of Cl-Tubocurarines Median Effective D