邻位连接技术：一种新的高灵敏度蛋白质检测技术.pdfVIP

维普资讯 ISSN l007．7626 中国生物化学与分子生物学报 2008年 4月 CN 11—3870／Q ChineseJournalofBiochemistryandMolecularBiology 24(4)：383～389 · 技术与方法 · 邻位连接技术 ：一种新的高灵敏度蛋白质检测技术 李丹滢¨， 周国华 (’‘中国药科大学生命科学与技术学院，南京 210009；’华东医学生物技术研 究所，南京 210002) 摘要 蛋白质组学(proteomics)诞生以来，高效准确的蛋 白质检测技术受到越来越 多的关注 ．最近， 一 种高灵敏度的蛋白质检测技术，邻位连接技术 (proximityligationassay，PEA)被建立．该技术采用 核酸适体 (aptamer)或单，多克隆抗体 核酸复合物作为邻位连接探针 (proximityprobes)．当一对邻位 探针 同时识别同一个 目标蛋 白分子时，它们将在 空间位置上相互临近 ，通过连接反应形成一段可扩 增的DNA标签序列，该标签序列能够反映待测蛋 白的种类及浓度 ．该技术将对蛋 白质 的检测转变 为对 DNA核酸序列的检测，实现 了特殊蛋 白质的检测 ，定量及定位 ．文章从该方法的产生背景，发 展过程 ，原理以及探针制备等方面对该方法进行 了系统的介绍，列举 了该方法的几种重要应用，并 对该方法在蛋 白质组学研究领域的应用前景进行 了展望 ． 关键词 邻位连接技术；蛋白质组学；蛋 白质检测 中图分类号 Q51 ProximityLigationAssay ：A New andHighlySensitiveProteinDetectionM ethod LIDan—Ying1) ZHOU Guo—Hua)) ． (”Collegeof ScienceandTechnology，ChinaPharmaceuticalUniversity，Sanjing 210009，China ； HuadongResearchInstituteforMedicine口nd Biotechnics，Nanjing 210002，China) Abstract Efficientnadprecisetechniquesforproteindetectionarecrucialinproteomicsstudies．Recently， proximityligationassay (PLA)，anew proteindetectiontechniqueinproteomics，wasdeveloped，nad attractingmore nad moreresearchersin thefield．Theproximityprobes，aptamers orcomplexesofmono／ polyclonal antibodywitholigonucleotide，aredesignedtobindpairwisetotargetproteinsandbeabletogive risetona amplifiableDNA sequencetagbyligationwhenbroughtinproximity，whichreflecttheidentitiesand amountsofthetargetproteins．Th isapproach employstheanalysisofDNA sequencesinsteadofthedirect detectionofspecific proteins，thus achieve hish— se