牧草种子生活力快速测定与发芽试验比较研究.pdfVIP

牧草种子生活力快速测定与发芽试验比较研究 魏国君，王迅，张海钰，谢雅琦，张丽思，柳平，姜云森 甘肃农业大学草业学院， 甘肃兰州（730070 ） E-mail：wangxun513@126.com 摘 要：对青海苏丹草、白三叶、陇东苜蓿、青海黄燕麦、草地早熟禾、多年生黑麦草、高 羊茅七种牧草种子样品分别进行常规发芽试验和生活力(红四氮唑)测定试验。用发芽试验和 四唑快速检测的结果测算两种试验间的相关性。采用公式:r=100-(V-G)/y ×100%、y=(V+G)/2 进行数据分析。试验结果表明，5 种草种的相关性高到低依次为苏丹草(r=100) 、陇东苜蓿 (r=97)、白三叶(r=89)、草地早熟禾(r=71)、青海黄燕麦(r=32)。 关键词：牧草种子，发芽率，生活力，TTC 种子发芽率是指种子在适宜条件下发芽并长成正常幼苗的百分率。种子生活力是指种子 发芽的潜在能力或种胚具有的生命力[1] 。发芽试验对种子萌发阶段进行培养，通过鉴定种子 萌发的情况，确定种子发芽率，是应用最广泛的种子质量检验方法。生活力的四唑测定是通 过鉴定种子内部活组织的染色情况，确定种子生活力的快速、有效、准确的质量检验方法。 通过对两种方法的比较，发芽试验通常出现以下几种原因导致结果不可靠:一重复间误 差超出规定范围;二细菌和真菌感染严重;三怀疑种子有休眠;四水分控制不好;五幼苗鉴定困 难[7];六种子休眠、硬实、损伤等。此外，牧草种子发芽试验持续时间相对较长。另一方面 生活力( 四唑)测定是世界公认、广泛应用的一种生物化学方法,具有操作简单、省时快速、结 〔〕 果准确、原理可靠、不受外界因素干扰、不受条件限制等优点,是一种室内检测的理想方法 5 。如果能用生活力评定或替换发芽率,不仅使检测工作高效、快速、准确,而且能广泛应用于 种子生产和营销中,切实解决种子公司的实际问题,意义重大。种子生活力四唑测定和发芽实 验都是种子质量检验的重要指标，同时种子发芽率和生活力之间存在着内在的必然的联系， 这一趋势虽是必然,但目前由于对生活力的四唑测定方法掌握还有限,或由于检验经验不足， 在使用中对种子生活力与发芽率两者之间的相关性还缺乏统一标准，很难直接以生活力来估 测发芽率。因此，开展种子生活力和发芽率之间相关关系的定量研究在种子检验和生产中都 有重要的意义。本试验通过对 7 个不同牧草品种样品分别进行发芽试验和生活力( 四唑）测 定, 用发芽试验和四唑快速检测的结果测算两种试验间的相关性。 1.材料和方法 1.1 材料 试验用种子是 2005 年的收获的青海黄燕麦（Avena sativa ）、青海苏丹草(Sorghum sudanense) 、白三叶（Trifolium repens ）、多年生黑麦草（Lolium pererme ）、陇东苜蓿（Medicago sativaL ）、高羊茅（Festuca arundinacea ）、草地早熟禾 （Poa pratensisL ）牧草种子样品 56 份。 恒温培养箱、培养皿 （90 ㎜）、滤纸、蒸馏水、解剖镜、解剖针、烧杯、小镊子、量筒、 玻璃棒、胶匙。 1.2 试剂 1.0% 2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC),磷酸二氢钾,磷酸氢二钠。 四唑药品配制：取 9.078g KH2PO4 溶于 1000ml 水 中，得 甲液 ；又取 11.876g -1- Na2HPO4·2H2O溶于 1000ml水中，得乙液；甲液和乙按2:3 的容积比混合得缓冲液。称取四 唑 10g溶于 1000ml 的缓冲溶液，配制浓度为 1.0%的四唑溶液 ，pH为 6.5-7.0 。配成的四唑 溶液在黑暗环境中可以保存几个月，但只能使用一次[3] 。 1.3 试验方法 1.3.1 发芽试验 发芽试验参照国际种子检验规程进