16S rRNA定量分析技术对绵羊瘤胃固相纤维降解菌的研究.pdfVIP

中国饲料 2007年第1期 16S rRNA定量分析技术对绵羊 瘤胃固相纤维降解茵的研究 内蒙古农业大学动物科学与医学学院 薛 丰 刘大程 扬州大学动物科技学院 王洪荣 内蒙古农牧科学院动物营养所 卢德勋 高 民 rRNA目标探针进行斑 kg的羯羊，使用特异性16S [摘要]本试验选择3只安装永久性瘤胃瘘管、体重25—30 点杂交研究绵羊瘤胃固相纤维降解菌的动态变化规律。结果表明：3种纤维分解菌的RNA占总茵数RNA的 15．76％：在各时间点产琥珀酸拟杆菌的相对含量均高于黄化瘤胃球菌和白色瘤胃球菌相对含量。 f关键词116S淑NA；纤维分解茵；斑点杂交 【中图分类号】S816．17 [文献标识码]A 25～30 withruminalcannul8wereusedto ofsolidattached 【Abstract]Threekgsheep studyvarietydisciplinarian ruminal bacteria．Threebacteriawas dot_blot cellulolytic by hybridisationusingspeci6c predominant cellulolytic quantmed 16S sumofRNAofthethreemain bacterial on 15．76 rRNA—ta喏etingpmbes．The cellulol”ic speciesrepresentedaverage RNA．Inall of was than山atofR．d6淞 ％ofthetotalbacterial relative size s锄ples，the populationFs∽cinogeneshigher and R∥倒咖如瑚． rRNA；cellul01ycicbact鲥a；dot-blothyb—disation fKeywords]16S 反刍动物对粗饲料利用的关键在于瘤胃微生 分2次饲喂，自由饮水。 物对粗饲料的消化、降解能力，其中细菌在数量上 1．2样品采集及预处理分别饲喂后0、2、4、8、 最多．担负着降解和发酵纤维性饲料的重要功能， 12h准确取瘤胃内容物50mL，用两层纱布过滤， 可以说瘤胃细菌在反刍动物营养中有着不可替代 将过滤后的残渣准确称重后加二倍体积的磷酸缓 的作用。按照瘤胃微生物栖居于不同的生态位点 冲液。水浴适度揉搓5min。使内容物与缓冲液充 的特征，将其划分为三大群落：存在于瘤胃液中的 分混合，用两层纱布过滤，将滤液1000g4cC离 游离微生物(液相微生物)、附着在饲料颗粒上的 心15min，取上清液再用100004℃离心 g 微生物(固相微生物)以及附着在瘤胃上皮细胞表 25min，取沉淀加少许磷酸缓冲液悬浮，将液体一 80℃冷冻保存，作为测定固相微生物的样