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高中生物一轮复习学案1 生物选修3 专题1 ? 基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过 ，赋予生物以 ，创造出 。基因工程是在 上进行设计和施工的，又叫做 。 1.1 DNA重组技术的基本工具 1.“分子手术刀”—— （ ） （1）来源：主要是从 中分离纯化出来的。 （2）功能：能够识别双链DNA分子的某种 的核苷酸序列，并且使每一条链中 部位的两个核苷酸之间的 断开，因此具有 性。 （3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 和 。 例如： ， 。 2.“分子缝合针”—— (1)两种DNA连接酶（ 连接酶和 连接酶）的比较： ①相同点：都缝合 键。 ②区别：E·coliDNA连接酶来源于 ，只能将双链DNA片段互补的 之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于 ，能缝合 ，但连接平末端的之间的效率较 。 (2) DNA连接酶与DNA聚合酶作用的比较 DNA连接酶DNA聚合酶DNA 链 链 模板 模板 模板 连接的对象 2个DNA片段 单个脱氧核苷酸加到已存在的单链DNA片段上 相同点 作用实质 形成 键 化学本质 蛋白质 3.“分子运输车”—— （1）载体具备的条件：① 。 ② 。 ③ 。 ④ 。 （2）最常用的载体是 ,它是一种 的、 的、独立于 之外，并具有 的很小的 分子。 （3）其它载体： 1.2 基因工程的基本操作程序 第一步： 1.目的基因是指： 。 2.获取目的基因的方法： （1）从 获取目的基因 包括： 文库，包含了一种生物的 基因 文库，只包含了一种生物的 基因，如 文库 （2）利用 扩增目的基因（PCR扩增仪） ①原理： ②条件： ， ， ， 。 ③过程：第一步：目的基因DNA加热至90～95℃受热 ； 第二步：冷却至55～60℃， 相应互补序列结合； 第三步：加热至70～75℃，在 酶作用下进行 第四步：如此重复 ，可以在短时间内大量扩增目的基因。 PCR技术与生物体内DNA复制的比较 DNA复制 PCR技术 区 别 解旋方式 酶催化 DAN在高温作用下 解旋 场所 细胞 （主要在 内） 细胞 （主要在 内） 酶 DNA 酶，普通的 酶 酶（ 酶） 温度条件 细胞内温和条件 需控制温度，在较高温度下进行 合成的对象 DNA分子 DNA片段或基因 联 系 ①模版：均需要