HPV16E6蛋白与hDaxx的相互作用及其对HeLa细胞凋亡的影响.pdfVIP

2008 4 28 4 Tum or V o.l 28, No. 4, April, 2008 293 DOI: 10. 3781 / j. issn. 2008. 04. 005 Basic Research 基础研究 HPV16 E6 hDaxxHeLa 王 鑫, 朱翠明, 刘安元, 尹卫国, 李金丽, 蔡恒玲, 万艳平 ( , 42 1001) [ ] 目的: 研究 HPV16 E6( hum n p p illom virus type16 E6)蛋白与 hD xx ( hum n de th dom in ssoci ted protein ) 的相互 作用及其对H eL 细胞凋亡的影响, 为探索H PV 16 E6 蛋白的致癌机制提供实验依 方法: 构建 pGADT7E6 和 pGBKT7 hD xx 重组载体, 利用酵母双杂交系统检测 HPV16 E6蛋白与 hD xx的相互作用, 并用W estern 印迹法检测二者在酵母菌中的 表达将 E6与 hD xx的真核表达载体共转染 H eL 细胞, 用 5氟尿嘧啶( 5FU) 诱导凋亡, FCM 法检测凋亡率结果: E6蛋 白与 hD xx 在细胞内存在相互作用共转染 pcDNA 3. 1( - ) /E6和 pcDNA 3. 1( - ) / hD xx的H eL 细胞, 随 pcDNA 3. 1( - ) / hD xx 转染量的增加凋亡率上升, 差异有统计学意义 (P 0. 01) 结论: H PV16 E6蛋白与 hD xx 在细胞内相互作用, hD xx 过表达可提高表达 E6蛋白的H eL 细胞对 5FU 的敏感性, 且这种关系存在剂量依赖性E6蛋白可能通过和 hD xx的相互作 用抑制细胞凋亡 [ ] 乳头瘤病毒 E6蛋白质类; H eL 细胞; 双杂交系统技术; 细胞凋亡; 蛋白 hD xx [ ] R737. 33 [] A [] 2008) Effect of interaction of human papillomavirus type 16 E6 protein and hDaxx on apoptosis ofHeLa cells WANG X in, ZHU Cuim ing, L IU A nyu n, Y IN W eiguo, LI Jinli, CA IH engling, WAN Y nping ( Institute of P thogenic Biology, N nhu U niversity, Hengy ng 421001, Chin ) [AB TRACT] Objective: To study the inter ction of hum n p p illom virus type 16 (HPV16 E6) protein nd hum n de th dom in ssoci ted protein ( hD xx) nd its effect on poptosis ofH eL cells to provide the expermi ent l b sis for exp loring the oncogen icm ech n ism ofH PV 16 protein. Methods:Recom b in nt vectors of pGADT7/E6 orpGBKT7/ hD xx w ere constructed. The in ter ction of E6 pro tein nd hD xx w s detected by ye st twohybrid system. Their expression in ye st w s detected by W estern blotting. The euk riotic p l sm ids of E6 nd hD xx were tr nsfected intoH eL cells. Apoptosisw s induced by 5FU. The poptotic r tio w s m e sured by flow cytom etry. Results: E6 protein h d intr