色谱仪的使用和维护.pdfVIP

第十三章 色谱仪的使用和维护 主要内容： 流动相 样品 手动进样阀 系统 日常维护 四元 泵 真空在线脱气机 梯度单元 流动相 要求 色谱柱对流动相的要求 与检测器匹配 脱气 避免卤素离子（不锈钢系统） 溶剂的黏度 防止细菌的生长 流动相 脱气 目的 色谱泵输液准确 输液均匀准确，脉动减少，保留时间和峰面积重现性提高 提高检测性能 防治气泡引起尖蜂，基线稳定，信燥比增加，溶剂紫外本底降低 保护色谱柱 减少死体积，防止填料氧化 方式 加热：简单，效果好，但容易造成流动相组成变化 抽真空：简单，效果较好。推荐设备：溶剂脱气机 超声波：简单，但效果不理想。推荐设备：超声波清洗仪 通惰性气（氦气）：可保持连续脱气，多用于低压梯度，费用较高 在线脱气机：可保持连续脱气，多用于低压梯度，只需一次性投资 流动相 更换 第一次启动泵用甲醇冲洗系统，停用，甲醇充满，以防长菌 更换新的流动相，用与两种流动相都互溶的溶剂做过渡，同 时注意流动相别毁坏色谱柱 使用过滤的、脱气的流动相，不使用放置过久的蒸馏水，可 -4-10-3M 的叠氮化纳 加入10 梯度洗脱时，最好使用粘度相同或相近的溶剂组成流动相 储液瓶中流动相的液位至少要高出流动相入口处10cm，防 止气泡进入溶剂中 流动相 污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿 命，并且影响泵的运行。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液(pH 4 至7) 中尤其如此。下列建议将会延长溶剂过滤器的使用寿命并维持泵 的运行。 使用灭过菌的溶剂瓶来减缓藻类生长。 使用新鲜配制的流动相，特别是水溶剂或盐缓冲液建议不超过 两天。 如果应用许可，在溶剂中加人0.0001 －0.001 M的叠氮化钠。 避免溶剂瓶暴露在直射阳光下。 用氩气置换流动相上层的空气。 定期清洗溶剂过滤器及溶剂瓶，每三个月至少清洗一次。 注意：不要使用没有安装溶剂过滤器的系统．可能会严重堵塞 系统 在线脱气机 在线脱气机 简单判断脱气机脱气是否正常 打开Purge阀，设定泵的流速2ml/min，提起当前所使用 溶剂瓶内的溶剂过滤头，使之脱离液面一小段时间，此时溶 剂传送管内会产生一小段气泡，放下过滤头，让此段气泡通 过脱气机，如果脱气机正常，气泡应消失或缩小。 简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否堵塞、 关闭泵，拧开脱气机出口或比例阀入口管线，此时溶剂 会因为重力流出，脱气机或溶剂过滤头堵塞时，溶剂会流出 不畅或不流出。 比例阀 判断比例阀是否内漏 设定泵使用一个单独通路(A)，打开Purge阀，流速 5ml/min，提起其他溶剂瓶内的溶剂过滤头直至离开液面 ，观察这些通路(B、C、D) 内的溶剂是否随着流动，正常 时均不应流动。 判断何时应该更换Purge阀内的过滤白头 使用纯水作流动相，打开Purge阀，流速5ml/min，观察系 统压力，如果超过10bar，应该更换。 单向阀 功能检查方法 在在线过滤器中人为地引入气泡，将流量设定为 1.0ml/min，然后观察气泡在聚四氟乙烯管中的运动 状态：如果气泡是平稳的上升，说明两个单相阀的功 能都是正常的，如果气泡是上去了而后又下来了，说 明吸