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· · 296 1真核表达载体构建 pEGFP—P2 * 及在AGS细胞的表达定位 窦丽芳1 胡丽华1 李一荣1 王琳1 kinase [摘要] 目的:构建人细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白(cyclin2dependentinhibitor)P21”9基因的 扩增P21 扩大培养、传代。荧光显微镜直接观察pEGFP-p21在细胞中的分布和定位,流式细胞术分析细胞周期。结果:鉴 阻滞的作用,P21对细胞周期的影响可能为其调节其他因子是始动因素,为进一步研究P21基因的功能奠定了实 验基础。 [关键词]P21”9;基因;基因表达;绿色荧光蛋白;人胃癌细胞; [中图分类号]Q343.1[文献标志码]A [文章编号]1004—2806(2008)06一0296一03 Constructionof 1 Vector pEGFP—P2eukaryoticexpression andits andlocationinAGScells expression DoU HULi矗“n WrANGLi咒 Li/’n竹g L,HrD729 ofClinical Medical Uni— (DepartmentLaboratory,UnionHospital,Ton翊iC01lege,Huazhong ofScienceand versity Technology,Wuhan,430022,China) Abstract construct l vectorandestablishstabletransfected eukaryoticexpression Objective:To pEGFP—p2 AGScellline fusion orderto P21 roleonitsdownstream expressingpEGFP—P21protein,in exploreregulation andBamHlsitesof wascar“edon PCR cloneatthecorrectEcoll amplifica— genes.Method:The pCDNA3一P21 by Fusion 1 vectorwasconstructed tionmethodandP21cDNAwas gene amplified. genepEGFP—P2expression by andDNA vectorwastransfect— subcloneandconfirmed

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