聚酰胺层析柱用于奶杏黄酮分离时柱寿命的研究.pdfVIP

维普资讯 科技进展 《Ac№r inScKmce＆Technlogy) 聚 酰 胺 层 析 柱 用 于 银 杏 黄 酮 分 离 时 柱 寿 命 的 研 究 2 z R 2I7／。、 王怡红 宋 苇 张征林 崔 群 (东南大学化学化工系，210096) (南京化工大学化工系，210009) 摘要 论述了以改性聚酰胺为柱填料对银杏黄酮进行柱层析精制的基本原理。测试了使用该法时的柱层析寿命，分 析了影响柱寿命的主要因索，提出并用实验证实了“先萃取后上柱 的新方法。有效延长了柱寿命，改善了GBE的质量。 关键词苎 璺塑 柱寿命 ，蕈 目，直 菇， 柱能够吸附全部银杏黄酮。我们进行的提取工作，不 1 前 言 是进行黄酮单体分离，是要得到黄酮总体，即要求总 黄酮类化合物广泛分布于植物药中，其药理作用 的黄酮的质和量。由于银杏叶中黄酮类化合物种类 多种多样。在新研制开发的富含黄酮类化合物的天 繁多、性质有差异 ，故而在一定的柱层析条件下，总有 然植物药中，首推以银杏叶提取物(GBE)所制成的药 一 部分黄酮不被吸附，一部分黄酮不被洗脱，所以层 品。GBE中起重要生物活性作用的化合物为黄酮糖 析条件将对 GBE的组成、含量、得率产生影响。另 甙类化合物(Fl0- glycosides)和银杏内脂类化合物 外，由于粗提物中含有一定柱层析条件下难以洗脱的 (Ginkgolidesandbilobalides)。黄酮类化合物中富含酚 杂质，难洗脱杂质和一部分吸附力大的黄酮留在柱子 羟基，是多环多元酚类化合物。目前在银杏叶中发现 上，影响下一次的吸附分离。 的黄酮类化合物有35种，按甙元的不同可分为单黄 纯聚酰胺作为柱层析填料 ，存在流速慢和低分子 酮甙类、双基酮甙类、二氢黄酮类、黄酮醇类、异黄酮 杂质混入问题，用改性的聚酰胺柱克服了上述问题， 类化合物，由于它们分子中所含羟基数 目和位置的不 且使单位聚酰胺的吸附能力增大。得到的提取物含 同、所含芳香核及糖甙数 目的不同，导致了分子极性、 量超过国际规定含量的 1倍以上 ，本文对改性聚酰胺 酸性强弱及水溶性的差异。国内外生产 GBE的方法 柱的柱寿命进行分析研究，使柱分离产物稳定。 大致有两种；银杏叶粗提物的溶剂萃取法和柱层析分 2 实验部分 离法。柱分离法中柱分离的好坏关系到GBE中黄酮 甙含量的高低，对于黄酮类化合物的柱层析分离来 2．1 实验方法 说，聚酰胺是较为理想的吸附剂。该吸附剂是利用黄 银杏叶以75％的乙醇一水溶液三次浸提，浸提 酮类化合物富含酚羟基的特点，通过分子中的酚羟基 液合并浓缩至小体积，加水沉降、过滤，得粗提液。 与聚酰胺分子中的酰胺基形成氢键缔合产生吸附。 银杏粗提液以一定流速(100mL／min)流过柱径为 吸附的强度主要取决于黄酮类化合物中羟基的数 目 4Omm、柱长为800ram、装柱量为 l8吨的改性聚酰胺层 与位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成 析柱体，进行吸附，3倍柱体积的去离子水冲洗，水洗 氢键的缔合能力大小，溶剂分子与聚酰胺或黄酮类化 液黄酮薄板分析呈阴性 ，用70％乙醇水溶液洗脱。 合物形成氢键缔合的能力越强，则聚酰胺对黄酮类酚 2．2 分析