HPLC法测定牛玄石颗粒中绿原酸的含量.pdfVIP

JIANGX1JOURN~ILOF TRADITIONALCHINESEMEDICINE HPLC法测定牛玄石颗粒中绿原酸的含量 ★ 曾荣香 段填楠。 赖建奇 (1．广东省佛山市中医院 佛山528000；2．江西省南 昌市食品药品检验 所 南昌330029) 摘要：目的：建立牛玄石颗粒中绿原酸的HPIC测定方法。方法：采用高效液相 色谱法，色谱柱：YWG—C18柱 (250mmx4．6 mm，10 m)；流动相：乙睛-0．4％磷酸溶液(15：85)；流速：1．0ml·min～；检测波长：327nm；柱温：室温。结果：绿原酸在 5～40 tzg／ml浓度范围内具有 良好的线性关系，相关系数r=0．9998，平均回收率为98．5％，RSD为0．5％。结论：该方法灵敏度高， 操作简便，结果准确可靠，可作为该制剂质量控制方法。 关键词 ：牛玄石颗粒 ；绿原酸；HPLC 中图分类号：R927．2 文献标识码 ：A 牛玄石颗粒 由牛膝、玄参、石斛、金银花等药物 2．4 阴性溶液制备 取缺金银花的阴性颗粒 0．6 组成，具有清热养阴、活血化瘀的功效，用于血栓闭 g，依供试品溶液制备法制备，即得阴性溶液。 塞性脉管炎、静脉血栓形成、动脉硬化性 闭塞症、脑 2．5 干扰试验 取对照品溶液、供试品溶液、阴性 血栓形成及其后遗症等。其主要成分为绿原酸、咖 对照溶液，按上述色谱条件测定，样品、对照品中的 啡酸、肉桂酸等。方中只有金银花含有绿原酸，考虑 绿原酸峰能与其他峰达到基线分离，分离度大于 到对照品获得的难易、各成分在处方 中的比例以及 1．5，阴性对照溶液没有干扰。 牛玄石 口服液原标准，我们选择方 中的有效成分绿 2．6 标准曲线的制备 取绿原酸对照品 10．10mg 原酸为测定对象，进行含量测定方法学研究 ¨。 至200ml容量瓶中加 50％甲醇溶解并至刻度 ，摇 1 仪器与试药 匀，即得0．0505mg／ml的对照品溶液。精密量上 仪器 ：Agilent1100series高效 液相 色谱仪 述对照品溶液取 1、2、4、6、8至 l0ml容量瓶中，加 (G1310AIsoPump、G1314AVWD)，N2000色谱工作 50％甲醇至刻度 ，摇匀，即得不同浓度的对照品溶 站，岛津UV2101PC紫外可见分光光度计。 液，分别吸取上述各对照品溶液2O l注入色谱仪 对照品：绿原酸对照品(购于中国药品生物制 中，测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，对照品 品检定所，编号为0753—200212)。样品：牛玄石颗 浓度为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程为 Y= 粒 (批号060416，060417，060418)。试剂：乙腈为色 39575X一1159．3(r=0．9999)，说 明绿原酸对照品 谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯。 在5～40 ml浓度范围内线性关系好。 2 方法与结果 2．7 精密度试验 将样品溶液 (批号 060416)，连 2．1 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅 续6次注入液相色谱仪中，测定峰面积，RSD为 烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0．4％磷酸溶液(15：85) 0．95％，表明精密良良好。 为流动相；检测波长为 327Dill。流速 ：1．0ml· 2．8 稳定性试验 将样 品溶液 (批号 060416)，经 min～；进样量 ：20 l；柱温：室温；理论塔板数按绿 过不同时间(1、2、3、6、8、24小时)注入液相色谱仪 原酸峰计算应不低于3000 。 中，测定峰面积，计算平均峰面积和RSD。RSD为 2．2 对照品溶液的制备 取绿原酸对照品适量，精 1．21％，说明样品在 24小时内稳定性好。 密称定，加甲醇溶解并制备成每 1ml含20．2P．g的 2．9 样品重现性试验 取同一批 号 (批号： 溶液，摇匀，即得。