SPE-HPLC柱前衍生化法测定大鼠血浆中熊去氧胆酸的含量.pdfVIP

一为检测波长，炅敏度高，准确度和精密度好。梯 度洗脱比等度洗脱，不仅提高了分离度，并缩短了试 1．1范围内，表明采用l％的自身对照的方法计算杂 验时问。 质含量结果是可靠的。 REFERI烈CES： 4．2我们对柱温20一30℃。缓冲溶液的pH在± uniIed [1]1kS诅悃n-’_，●-汕c∞岫正吼．h咄uSP29一 O．2范围内变化进行了耐用性实验，结果主成分及 NF24．20∞：10嘶． B^t油一 杂质的保留时间有影响，但是相对保留时间没有影 【2】11-c ，-mc叩哪16∞．I盹B嗍，2002：鲐8． 959． 响，表明本方法耐用性良好。 【3】ck Ch枷￡al 4．3由于采用1％自身对照外标法检测杂质Lc45 l耐m时P‰B，2005：172·173． IcH 【4】 Hmmmli≈cd瓢pBnik Ncw 的含量，为了确保杂质测定量的准确性，我们对巳知 GuideI如e：lI州6∞fnD’岵 sII蛔脚，Q3A R ．2002． 杂质Ic-45进行了与硫酸羟基氯喹的相对响应因子 SPE罐PIC柱前衍生化法测定大鼠血浆中熊去氧胆酸的含量 王琪1一，谢欢1，李仙又3，丛龙波1”，黄雅洁1，袁海龙1‘ L解放军3∞医院暨解放军中药研究所，北京】啪39；2中药现代剧 剂教育部重点实验室，江西中医学院．江西南昌3删；3．解放军．总后勤部卫生部药品仪器检验所。北京100071 熊去氧胆酸 u≈0d∞xychoHc8cjd，UDCA 是一2．1色谱条件与系统适用性试验 以Z0rb“SB mm×250 种亲水、非细胞毒性的胆汁酸，它是熊胆汁成分之 C1B 4．6 nllll．5¨j11 为 mL· 一，是公认的治疗原发性胆汁郁积性肝硬化、原发性 固定相，乙腈-水 65：35 为流动相．流速l 硬化性胆管炎等各种胆汁郁积性肝病的首选用 min-‘，紫外检测波长为245nm，室温。理论板数按 药u“。近年来．以德国福克大药厂生产的ur舯falk熊去氧胆酸峰计算应不低于5000。 为代表的uDcA制剂在临床上取得了良好的疗效。2．2标准溶液和内标溶液的制备 39．26 本课题组对UDcA磷脂复合物进行了深入的研究， 精密称取UDcA n唱置100mL的量瓶 mL 结果表瞑其具有选择性强、特异性好、药物用量小、 中，用甲醇溶解并稀释定容至刻度。取溶液10 置loo 毒性低、生物利用度高等优点。本文建立了大鼠血 mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，作为对照品 储备液 浓度为10。4mol·L。 。精密称取cA 浆中uDcA含量测定方法。旨在为uDcA磷脂复合 40．85 物体内药动学研究提供科学可靠的检测方法。 mg置100mL量瓶中，用甲醇溶解并定容至 l仪器与试药 刻度。取溶液lO置loomL量瓶中，用甲醇定容至 刻度，作为内标储备液 浓度为10～mol·L-1 。称 uDcA-PIJc 自制，批号座机电话号码 ，熊去氧胆酸 取Na2HP04‘12H204．54g置500mL量瓶中，用水 对照品 中国生物制品检定所，批号0755-9003 ；胆 定容至刻度 浓度为0．067 酸 cA。中国药品生物制品检定所．批号078-9211 ； ml·L。 ．称取 urs删k 德国福克大药厂 ；2’一溴代．2’·萘乙酮、N，KH2P吼4．54g置500mL量瓶中，用水定容至刻度 mol·L。1 N-二异丙基乙胺 含量为99％，si鲫a—AIdrich公司 浓度为O．067mol·L-1 ，以O．067 产品 ；乙腈、甲醇 色谱纯 ，磷酸氢二钠、磷酸二氢 rIlol·L-1 №2HP04：O．067 钾 分析纯 ，纯水，氮气。 7的磷酸盐缓冲液。 wi3tar大鼠，200±209[北京维通利华实验动物 五3血样处理及固相革取方法 技术有限公司提供，动物合格证号scxK 京 2002-大鼠股动脉取血5mL于非肝素浸澜的试管中， 0003]。 4000 000 r·minl离心10min，精确吸取血清l 2方法 作者简介：壬琪，女。硬士研究生。 E-Mij：bhld町j9辨窜163．蜘 ‘通讯作者：衰毒龙。博士．副 宙 究员．硬士生导师1WF瓯 010】鲫3324 E咀正l；巾h小_瑚套1抵嘲 ·336· 相当于60nmo卜L“ ，转移至9mL的试管，45℃ 氮气吹干。lOoo止含UDCA的血清样品加入试管 内，样品混合，用pH7的磷酸盐缓冲液5mL稀释。 MuDcA母液。45℃氮气吹干。lmL空白血浆加 固相萃取小柱用2mL甲醇及3-nL的高纯水活入其中，余下步骤按照圊相萃取及衍生化的步骤进 化． 流速3mL·min。 ，血清样品连及内标物的磷 行。20汕进样，纪录色谱图。以^。，Dc^朋c^为纵坐