石蜡制片术中切片过程的常见问题及解决方法.pdfVIP

海南医学院学报2006，12(3)：255 of 255 JournalH越nanMedical coilege 石蜡制片术中切片过程的常见问题及解决方法 吴民华1。柯湛华2 ， (广东医学院 1．组织学与胚胎学教研室；2．基础学院，广东湛江524023) 【关键词】石蜡包埋；组织；切片技术 [中图分类号】R329—33[文献标识码】B 【文章编号】1007—1237(2006)03一0255—0l 石蜡包埋制片术是组织切片制作最常用的一 包埋时的缺点。一般待蜡块周围凝结一层，即可放 种技术。其基本步骤包括取材、固定、脱水、浸蜡、 人冷水中。 包埋、切片、染色和封片等，其中切片是最重要的 4切片粘在切片刀上或蜡块上且不易取下 环节。我们在工作实践中发现，切片制作过程中常 原因：切片时有静电作用．产生静电吸引．在 常由于多方面的原因在切片这一环节中遇到困 冬季或气候干燥时常出现这种情况。 难，甚至导致制片失败。针对切片过程中出现的问 解决方法：可用加湿器，以增加空气中的水分， 题，我们积极寻找原因，探究解决问题的方法。现 而减少静电作用。 以问题一原因一解决方法的模式，报道如下。 5切片厚薄不均 1 切片上卷且不能形成连续蜡带 原因：①切片微动部分失灵，齿轮跳格。②蜡 原因：①切片刀不够锋利。②切片刀与蜡快的 块太大，过硬．转动时刀刃受震动。 角度不当。③蜡块四周留蜡边太少。④石蜡硬度过 解决方法：①修理切片机失灵的部分，调整螺 大，黏度不够。 旋，加机油润滑零件，必要时需请专业技术人员调 解决方法：①重新磨刀。②调整切片刀的角 整切片机。②如蜡块过大，以后取材时注意取材的 度。③可重新包埋或将蜡块四周熔化，再放人包埋 大小。蜡块组织过硬，可返回水中浸泡，再重新脱 框中补蜡。修理蜡块时组织块周围保留的石蜡以 水和包埋。 2mm左右为宜【”。④蜡块过硬可适当加些蜂蜡，或 6切片碎烂或组织脱出并与石蜡分离 更换熔点较低的石蜡重新包埋。 原因：①组织脱水，透明不够。②浸蜡时间过 2切片弯曲且不能形成直带 长，浸蜡温度过高。③组织脱出是由于脱水、透明 原因：①蜡块上下或左右两边不平行。②蜡块 时间不够，或组织中含有乙醇等，石蜡不易渗入组 与切片刀刀口不平行。③组织块外形不整齐。④切 织中，故导致石蜡与组织分离。④二甲苯使用时间 片刀各处的锋利程度不一致。 过久。 解决方法：①将蜡块四边反复修平对称。②调 解决方法：①必须按组织大小厚薄选择脱水、 节蜡块夹持器，使其与切片刀平行。③修整组织块 透明时间。②依组织的性质和结构特点确定浸蜡 时，注意修切整齐。④移动切片刀，更换刀口位置。 时间，控制包埋温度。一般这种情况难以补救。③ 3切片上出现裂纹 脱水，透明渗蜡不够，应重新熔化，退回人二甲苯 原因：①切片刀上有小缺口，或刀口不平整。 和酒精，再进行渗蜡包埋。④更换二甲苯。 ②组织中可能含有较硬之物质，如固定液之结晶 7 切片皱褶太多且不能完全展开 石灰质。③包埋时石蜡冻结太慢。 原因：①石蜡太软或室温过高。②切片刀上粘 解决方法：①切片刀某处有缺口，可调换刀口 有残余的石蜡，刀口不干净。③组织浸蜡时间不 部位或重新磨刀。刀口上缺口过多且不平整，可先 够，或脱水、透明不够。④切片刀不锋利。 将刀锋垂直在磨刀石上轻轻磨数次，然后按常规 解决方法：①可将蜡块放人冰箱中冰冻后切 磨刀【2】。②组织中硬性物质太多，则不宜用。③纠正 片，并在切