Q10检测方法.pdfVIP

A HPLC 法 1. 仪器和试剂 1.1 高效液相色谱仪： Waters 515 输液泵；Waters 2487 紫外检测器；GS2010 色 谱工作站 1.2 恒温水浴锅 1.3 分析天平：感量0.00001g 1.4 棕色容量瓶（50mL ） 1.5 辅酶Q10 对照品（纯度99% ） 1.6 甲醇（色谱级） 1.7 无水乙醇（分析级，0.45μm 微孔滤膜过滤） 1.8 微孔滤膜（0.45μm ） 2. 色谱条件 色 谱 柱：Nova Pak 4.6×150mm 5μm 流 动 相：甲醇：无水乙醇（50：50，V/V ） 检测波长：275nm 灵 敏 度：0.01AUFS 流 速：1mL/min 柱 温：35℃ 进 样 量：10μL 3. 溶液制备 3.1 对照品溶液制备 精密称取辅酶Q10对照品约10mg于50mL 容量瓶中，在50℃条件下加热2min 溶解后，冷却并加入无水乙醇定容。即得对照品溶液。 3.2 样品溶液制备 精密称取辅酶Q10 样品约 10mg 于50mL 容量瓶中，加入无水乙醇40mL 在 50℃条件下加热2min 溶解后，冷却并定容，即得样品溶液。 4. 样品测定 在上述色谱条件下，待仪器稳定、基线平稳后进样测定，辅酶Q10 保留时间 约为7min 。 受控文件 不得擅自复制 第 1 页 共 3 页 5. 含量计算 采用外标法计算辅酶Q10 含量。 × × × A W V K % 1 0 1 ×100 含量（ ） × × A V W 0 0 1 其中 A1：样品溶液中辅酶Q10 的峰面积 A ：对照品溶液中辅酶Q10 的峰面积 0 W ：样品的称样量 mg 1 W0 ：对照品的称样量 mg V1：样品的体积 mL V0 ：对照品的体积 mL K ： 对照品的纯度 样品含量结果取两个平行样品含量的平均值。 B UV 法 1. 仪器和试剂 1.1 UV-2450 紫外-可见光分光光度计 1.2 恒温水浴锅 1.3 分析天平：感量0.00001g 1.4 棕色容量瓶（25mL ） 1.5 移液管（5 mL ） 1.6 无水乙醇（分析级） 2. 样品溶液制备 精密称取辅酶Q10 样品约 10mg 于50mL 容量瓶中，加入无水乙醇40mL 在 50℃条件下加热2min 溶解后，冷却并定容，精密吸取此溶液5.0mL 用无水乙醇 稀释至25mL 。 3. 样品测定 打开仪器电源，预热20min ，待仪器自检通过后，在275nm 处以无水乙醇做 为空白，测定样品溶液吸收值。 4. 含量计算 以辅酶Q （C H O ）的吸收系数169 计算含量。 10 59 90 4 受控文件 不得擅自复制 第 2 页 共 3 页 A ×250 含量（%） 169×W 其中 A ：样品溶液在275 nm 处的吸收值 W ：样品的称样量 g 250 ：样品的体积 mL 169 ：辅酶Q10 吸收系数 样品含量结果取两个平行样品含量的平均值。 受控文件 不得擅自复制 第 3 页 共 3 页