第三章+++RNA转录.ppt

E. coli RNA polymerase E.Coli各σ识别的启动子的序列 ? 抗终止的机制 依赖于噬菌体本身的依赖ρ因子的终止子 依赖ρ因子的终止子上游有抗终止信号(靠近PL 的nutL，靠近tR1的nutR nut—PN utilization) 抗终止蛋白和nut位点的结合，等待RNApol经过 时修饰RNApol的构象，拮抗寄主编码的终止蛋白ρ的活性,使之通过那些依赖ρ的终止子 A 16 （线性片段） U20 (线性片段) 逆环化 逆环化 （2） C—15: 逆环化 将UUU加到 5’端的能力 表明: 该环形产物具有连接两个RNA分子的能力 （3） L—19： 具有酶活性 即Cech等人证明的 L—19 的 polyC 聚合酶活性 L—19 分子 L—19 分子 （4）总结： a、 四膜虫的 35SRNA 的内元有自身催化的性质 即 --- 将一处已有的磷酸二酯键转变成另一处新的磷 酸二酯键，不需要额外的能量 因此： 内元可以看作是 RNA重排酶（RNA rearrangease） 或 RNA异构酶（RNA isomerase） 其中： 拼接反应中，“酶” 和底物是同一个分子，且反应后 变成了不同的分子 b、L—19的 polyC 聚合酶活性进一步表明 L—19 具有酶的 主要特征： 专一性强 加快反应速度 反应前后酶分子保持不变 人们称这种由RNA构成的酶为---- 核糖核酸酯酶（ribozyme） 可简称 R酶 四、第二类内元的拼接 1、拼接点序列 7核苷酸的保守序列 （Branch Site ） 3’ 拼接点上游 6bp ~ 12bp 处 ● 5’----exon----- GUGCG---------B.S----Py AU ----exon---3’ 供点 受点 ----Py Pu Py Py U A Py--- 100% ● 在Branch Site 的两侧存在一些短的序列， 与其上游10-50Nt处互成 IR,形成茎环结构(但A 不包含在 IR序列内, 从而被排除成芽状突起） 5’--GUGCG--------------------PyPuPyPyUAPy-----PyAU—3’ Intron IR IR 5’ G AU 3’ A 2、拼接机制（Splicing mechanism） Int ron IR IR A 5’ G AU 3’ Exon 1 Exon2 G A intron PyAU Matural RNA “Lariat” intron 套索状内元 转酯攻击位点 intron OH AU 2‘ A 3‘ G 五、核基因mRNA内元的拼接 1、相关概念 Euk.的细胞中，有许多碱基数在100 ~ 300之间 的小分子RNA,每个细胞有 105~106个 snRNA： 细胞核中的