抗凝系统的临床检测.pdfVIP

论著。。，一。。。。。。．。。。一。一……一…裹苎苎烹您。竺：：惹黧苎!耋篓黧苎墨兰；兰愁。2亳，竺嬲2嬲恐 证”、。肾阴虚让”。 例【J】．长春中医药大学学报，2007，23(5)：71． 参考文献 【2】李晓梅，何静．绝经后女性ICVD患者E和CGRD变化及 【l】邱英，黄可佳．自拟益肾疏肝汤治疗围绝经期综合征30中药干预【J】．长春中医药大学学报，2007，23(1)：82—83． 抗凝系统的临床检测 闫珍维(黑龙江省尚志市妇幼保健院150600) 【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(20lo)34-01∞一02 【摘要】用于防治血管内栓塞或血栓形成的疾病，预防中风或其它血栓性疾病。是通过影响凝血过程中的某些凝血因子阻 止凝血过程的药物。正常人由于有完整的血液凝固系统和抗凝及纤溶系统，所以血液在血管内既不凝固也不出血，始终自由流动 完成其功能，但当机体处于高凝状态或抗凝及纤溶减弱时，则发生血栓栓塞性疾病。 【关键词】抗凝血类型检测 l一}抗凝血酶一I口lAT一珊}测定 I二)蛋白C测定 1．原理 测定方法有多种，常用的有活性测定和定量测 1．原理 蛋白C的发色底物法测定原理是将待测血浆中 定法，此处介绍发色底物法定量测定。发色底物法测定AT— 加入蛋白C激活剂(铜斑蛇的蛇霉)。活化的蛋白C(APC)可水解 m的原理是将待测的血浆中加入过量的凝血酶，在37℃条件 随后加入的发色底物，释放出显色剂PNA，PNA的量与血浆 下孵育一定时间，使血浆中的AT一Ⅲ与凝血酶结合，形成l： 中APC的量成正比。 l的复合物。然后加入显色底物并继续孵育，剩余的凝血酶作 2．试剂与方法 与上述发色底物法AT一Ⅲ类似，此处不 用于显色底物，裂解出显色基团对硝基苯胺(PNA)。反应体系再做介绍，或可参照有关的操作说明书。 的显色强度与剩余凝m酶的活性呈正相关，与待测血浆中的 3．临床意义PC缺乏的临床主要表现为静脉血栓，发病 AT一Ⅲ活性呈负相关。 部位以下肢深静脉与肺检塞常见；浅表性血栓性静脉炎、肠系 2．试剂 膜静脉及脑静脉血栓也较多见。 (1)标准血浆。 PC缺乏症可由获得性或遗传性原因引起：①获得性PC缺 X (2)底物$2238，浓度为510-Tmmol／L。 乏症：皿浆蛋白C活性和水平降低可由PC的生成减少、消耗过 (3)凝血酶溶液牛凝血酶用生理盐水配成7．5～7．7U／Ⅱll，多、辅因子PS活性下降，以及药物、炎症、肿瘤、狼疮抗凝 每，10ml溶液中加入聚乙二醇6000(PEG6000)0．8g混合。 物等不同原因引起；②遗传性PC缺乏症。 10-3mOl／L (4)Tris肝素缓冲液0．05mOl／L，7．5X (兰)游离蛋I!IS(FPS}测定 EDTA—Na，，1．75X10-4mmol／L氯化钠，用1mol／L盐酸调1．原理 免疫比浊法第l步先向待检血浆里加入吸附了乳 节pH至8．4，每升缓冲液中含肝素3万U。 胶的纯化C蛐，在钙离子存在的情况下，血浆中的游离PS与C。B 3．操作 结台；第2步再加入抗PS的单克隆抗体乳胶试剂，使其与血浆 (1)将标准血浆及待测血浆进行一系列稀释。 中PS-C。。复合物结合成大分子复合物。待检血浆中大分子复 合物的浓度与游离PS的量成正比。 (2)将一系列稀释的标准血浆及待测标本与Tris肝素缓冲液 混合，于37℃温育5分钟。 2．试荆与方法本项目所用免疫比浊法测定的具体方法在 (3)加过量的凝血酶50“1，混匀，37℃温育30秒。 本书免疫学检验