EDTA缓冲液在微波热修复神经组织糖皮质激素受体免疫组化染色中的应用.pdfVIP

第 l9卷 第2期 四J1I解剖学杂志 VO1．19 No．2 2011年 6月 SICHUAN JOURNALoFANAToMY June 2011 EDTA缓冲液在微波热修复神经组织糖皮质激素受体 免疫组化染色中的应用 谢璐霜 (成都 中医药大学 基础 医学院，成都 610075) 【摘要】 目的 比较不同修复液对大鼠糖皮质激素受体 (GR)在神经染色效果的影响。方法 分别采用枸椽酸修 复液，pH8．5、9．0、9．5的EDTA修复液对大脑切片进行微波修复，比较不同的修复液显色阳性细胞数和 OD值。 结果 EDTA修复液显色效果更明显，pH9．0的EDTA修复液显色效果最明显 。 【关键词】 EDTA；神经组织；糖皮质激素受体 【中图分类号】 R446．6 【文献标识码】 A 【文章编号】 1005—1457(2011)02—17—02 Application ofEDTA BufferSolutionwithM icrowaveAntigenRetrievalfor ImmunohistochemicalStainingofGlucocorticoidReceptorinnervetissue XieLushuang (SchooloJ’BasicalMedicine，ChengduUniversityofTraditionalChineseMedicine，Chengdu610075，China) [Abstract] Objective Todetecttheefficacyofdifferentrepairsolutioninimmunohistochemiealstainingofglu— cocorticoidreceptor(GR)innervetissue．Methods TWOkindsofbuffursolutionofSodium citrateandEDTA with pH 8．5，9．0，9．5withmicrowaveantigenretridevewasusedtostainGR inbrainslice．TheeelInumberandOD of GR indifferentretrievelsolutionwerecompared．Results TheeffectinEDTA wasbetterthaninsodium citrate．pH 9．0wasthebest． [Keywords] EDTA；nervetissue；glucoeorticoidreceptor(GR) 脑是神经系统的高级活动器官。神经免疫 内分 石蜡切片，常规脱蜡至双蒸馏水洗 ，过氧化氢封 泌网络学说的建立，许多研究发现在神经一内分泌一 闭，微波修复 ，中火 ，2次 ，旋 3min，间隔至湿盒完全 免疫系统之间有广泛 的联系。内分泌激素糖皮质激 冷却 。1组采用枸橼酸钠修复液 ，2组采用 pH8．5 素可作用在神经组织发挥调节作用。但因为大脑组 的EDTA修复液，3组采用 pH9．0的EDTA修复 织 自身结构和皮质类激素受体的特殊性，用免疫组 液 ，4组采用 pH9．5的EDTA修复液。双蒸水洗至 织化学方法在大脑检测糖皮质激素受体 (glucocor— PBS。 ticoidreceptor，GR)时有其特殊性。抗原修复是免 采用 SP法作免疫细胞化学染色。用羊血清封 疫组织化学方法的关键 ，直接影响显色质量 ，本实验 闭后，加第一抗体兔抗鼠nNos(1：200SantaCruz公 旨在探讨脑组织免疫组织化学表达 GR，最佳修复 司)，37℃ 2h，4~C过夜 ；生物素标记 的羊抗兔 IgG， 液及 EDTA 的PH值 。