HPLC法测定肌苷注射液含量不确定度的评价.docVIP

湿化学法测定总有机碳的不确定度评价 柏学敏 吕文军 黑龙江省黑河市药品检验所（164300） [摘要] 目的：对不确定度进行。方法，。结果扩展不确定度U为k=2。结论采用本方法建立的模型可用不确定度的Abstract：ObjectiveTo set out the puocedure for estimation of measurement uncertainty for the determination of Inosine Injection by HPLC. Method: Determination of Inosine by HPLC, it analyzes the uncertainty of the entire process measurement. Results: The expanded uncertainty U95 was 1.8% k=2.Conclusion ：The method for evaluation of the uncertainty was established in determination of Inosine Injection by HPLC. Key word：measurement uncertainty; Inosine; HPLC 在药品检验中，经常用HPLC的方法来测定药品的含量。不确定度是表征合理地赋予被测量之值的分散性，与测量结果相联系的参数[1]。测量不确定度是测量质量的指标，合理地赋予被测量值的区间，用于判断该测定值的可靠程度。为确保药品检验的结果的准确性，有必要对HPLC法测定药品含量进行不确定度的评价。我们以高效液相测定肌苷注射液含量为例，进行了不确定度的评价，对HPLC法不确定度的评定有一定的意义。 1.仪器与试药 1.1仪器 高效液相色谱仪（Waters e2695-2998）；色谱柱（Sunfire C18柱250×4.6mm，5μm）电子天平(d=0.01mg/0.1mg，可互换)Mettler AE240。 1.2试药 肌苷对照品由中国药品生物制品检定所提供，批号（140669-200702）纯度为100%。 2实验方法与结果： 2.1实验过程 精密称取肌苷对照品10.12g，置100ml量瓶中，加水适量溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取续滤液10ml，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，得对照品溶液。精密量取肌苷注射液2ml，（约相当于肌苷0.1g），置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取1ml，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，得供试品溶液。照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录ⅤD）测定，用十八烷基键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（10：90）为流动相；检测波长为248nm。各取20μl注射HPLC仪，记录色谱峰面积，按外标法以峰面积计算含量。 2.2数学模型 Q= Q：样品的标示百分含量；AX：样品的峰面积 ；WR：对照品称样量 （mg）；P纯：对照品的纯度；fR：对照品的稀释因子；AR：对照品的峰面积；C标：样品的标示浓度（mg/ml）；fX：样品的稀释因子；rep：重复性。 不确定度来源分析 3.1天平称重带的的不确定度 3.1.1天平示值的不确定度 使用的天平d=0.01mg由校准证书得到天平的最大允差为±0.1mg属于B类不确定度，服从矩形分布，则u1(R)===0.0577mg 3.1.2天平称重重复性不确定度 0.5×最后一位有效数字 [2] u2(R)=0.5×0.01=0.005mg 3.1.3称重时重复计算两次 u(R)==0.0579 相对不确定度urel()===0.00572 3.2纯度带来的不确定度 对照品购自中国药品生物制品检定所，未标明含量，视为100%，urel(PR)=0。 3.3稀释过程中稀释因子带来的不确定度 对照品稀释因子是由100ml容量瓶、10ml移液管和50ml容量瓶来完成。也就是1：100和1：5稀释。 urel(f100)= urel(f5)= 容量瓶和移液管的标准不确定度来源为；校准、重复性、温度。 3.3.1体积校准的不确定度，容量瓶、移液客经检定均为A级，100ml、50ml容量瓶容量允差分别为±0.10 ml、±0.05 ml，ml，按照分布计算： u1(V100)==u1(V50)= 0.0204 u 1 (V10)= 0.00816 3.3.2重复性，容量瓶、移液管通过重复测定10次进行统计，则u2(V100)=0.02ml u2(V50)=0.012ml