水中大肠菌群快速检测方法-酶底物-孙宗科.docVIP

水中大肠菌群快速检测方法－酶底物法与多管发酵法的比较 《卫生研究》2006第3期 孙宗科 丁培 薛金荣 陈西平1 吴榕2 张雅婕3 张淑红4 遇晓杰5 中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所，北京 100021 摘要： 目的 比较酶底物法与多管发酵法用于水中大肠菌群的检测。 方法 应用加标试验和实际水样检测的方式，比较酶底物法与多管发酵法用于水中大肠菌群检测结果的一致性，以及假阳性率。 结果 酶底物法与多管发酵法用于水中大肠菌群检测结果具有一致性，假阳性率无统计学意义的差别。 结论 酶底物法可以用作评价水质微生物污染的标准方法。 关键词：大肠菌群 酶底物法 多管发酵法 快速检测 Comparison between rapid detection method of enzyme substrate technique and multiple-tube fermentation technique in water coliform bacteria detection Sun Zongke, Wu Rong, Chen Xiping, et al. Institute for Environment Hygiene and Health Related Product Safety, Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing 100021, China Abstract：In order to compare between rapid detection method of enzyme substrate technique and multiple-tube fermentation technique in water coliform bacteria detection, inoculated and real water samples are included in this experiment. Results demonstrate that enzyme substrate technique shows equivalence with multiple-tube fermentation technique. It is suggested that enzyme substrate technique can be used as a standard method for water microbiological safety evaluation. Key words：coliform bacteria, enzyme substrate technique, multiple-tube fermentation technique, rapid detection 目前我国对生活饮用水、水源水、地表水等进行卫生学评价，检测的指标为大肠菌群和粪大肠菌群(faecal coliforms)，以这两种指标作为粪便污染的指示菌。采用的标准检测方法为膜过滤法和多管发酵法酶底物法采用大肠菌群能产生β-半乳糖苷酶（β-D-galactosidase）分解ONPG（Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside）使培养液呈黄色，以及大肠菌产生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解MUG（4-methyl-umbelliferyl-β-D-glucuronide）使培养液在波长366nm紫外光下产生荧光的原理，来判断水样中是否含有大肠菌群及大肠埃希氏菌。酶底物法可以采用成品的培养基及试剂， 责任作者：陈西平，男，研究员 1中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所，2 农业部食品质量监督检验测试中心（上海），3 北京市疾病预防控制中心，4 河北省疾病预防控制中心，5 黑龙江省疾病预防控制中心 操作方便；无需确认试验；酶底物法检测时间较短，18h-24h即可同时判断水样中大肠菌群和大肠菌的MPN值。指定受检物检验技术defined substrate technology），其MMO-MUG培养基、试验材料和仪器由爱德士公司提供，试验菌株来源于中国普通微生物菌种保藏管理中心中国医学微生物菌种保藏管理中心100 ml的无菌稀释瓶量取100 ml水样，加入2.7±0.5 g MMO-MUG培养基粉末，混摇均匀使之完全溶解，将水样全部倒入51孔无菌定量盘内，以手抚平定量盘背面以赶除孔穴内气泡，然后用封口机封口。放入37℃培养箱中培养24小时后进行结果判读，如果结果为可疑阳性，可延长培养时间到28小时，超过28h之后出现的颜色反应不作为阳