巯基苯硼酸修饰的磁性金球在糖肽和糖蛋白富集应用.pdfVIP

第十七届全国色谱学术报告台及仪墨展览会会议论文集 o．G007 巯基苯硼酸修饰的磁性金球在糖肽和糖蛋白富集中的应用 唐佳，戚大伟，邓春晖，张祥民” 复H大学化学系，上海200433 本文合成了表面修饰了纳米金球的碰性材料井在金球表面修饰了巯基苯硼酸，采用反相液相色 谱(RPLC)测定了磁性材料上巯基苯硼酸的固定量。利用硼酸和糖的可逆反应，以标准糖蛋白辣根 过氧化物酶(HRP)为对象，探譬i了磁性金球在糖蛋白质谱分析样品前处理中的应月j。以高分辨牢、 中富集糖肚并进行质讲鉴定。除，进行精肚的选择性富集外，该磁性金球还被成功地应用在耱蛋白 捕获rlI。利川磁性纳米台球富集糖蛋白和糖肚为牯出白组学研究提供了一种简单易行的样一协前处理 方法。 关键词：磁性金球，巯基苯硼酸，富集，糖肚，糖蛋白 1导论 塘基化石蛋向质的一种重要的翻译后方式，在生物体中约有一!F以上的蛋白质会发生糖基化。 越米越多的文献报道显示，糖基化对蚩自质的功能有着重要的影响，如：对蛋白质的折叠、运输、 定位起着重要的作川【1】；免疫系统中儿乎所有的关键分子都是糖蛋白(2】；而蛋白质的糖基化程度鸡 汤链结构的异常变化删常是痛^E及其它疚病发生的标志[4-6】。经过各种修饰的磁性材料被J’泛地廊 Ⅲ，蛋白质纽学研究领域．例如快速酶解f9】、磷酸化肚段的富集【】o]、抗体的固定等。方便低廉的 合成方式平¨简便快述钉效的应川方法使得磁性材料的发展与应用越米越受到重视。本文中合成了表 面包覆了四氧化j铁的磁性碳球，在磁球表而修饰了纳米金球，并利用盒和巯摹的反应在纳米金球 表面I目定了巯萆苯硼酸，井使川反相高敛液相色谱(RPLC)估测了磁性材料上巯基苯硼酸的同定情。 由丁硼酸能和糖分子形成内酯结构．利州这特性，我们州苯硼酸修饰的磁性金球进行了低浓度糖 肽的富雄和枯蚩IJ的富集，井采埘MALDI．QIT．TOF．MS进行了糖肚的鉴定，取得了较好的结果。 2实验结果 2l巯基苯硼酸修饰的磁性材料的合成 一ne口tJvechdr” …lt…hⅡ口 謦～囊一薰 翠 Figurel_Thesynthesis procdumofboroaic％idfunctionalize．dFqO·@c@Aum8印nIcmicrospercs cn “通讯作者，K祥民，Email：xmzh∞g@fud=edu 第十七届全国色谱学术报告舍及仪器展览会会议论文集 2．2功篚化磁性金球富集糖肽和糖蛋白 ^ 34KD_ ： ㈧。弘} ； 25KD鬻黼 ’ ● h。．翻氯；{ 1”…”‰”““” ofMALDI-TOF—MSofIIRP afterthebotanic Figure2(”co…p…n spcclm A)Thc”ed…ofu”malⅫt acid·funodonalizcd t magnetic Ireatmcntof ofHRP eluateallcrbotanic micwsphcrcs 5ng／l__Irypticdigests B)The acid-funcdonalizod of ofIIRP magnetic 5nej，ILtryptic Peptide containing mlemspheres帆atmcflldigests fragments a”markedwith