中药治疗脑出血抗脑损伤、促修复机理研究的思路与方法.pdfVIP

中药治疗脑出血抗脑损伤、促修复机理研究的思路和方法 黎杏群湖南省中南大学湘雅医院中西医结合研究所(湖南410008) 1 研究的工作基础 1．1 中医肝脏象本质研究，20余年的工作积累从证型研究人手，证病结合，医药结合，临床实验 结合；从基础、临床、新药开发、药效机理。肝风内动证病理生理学基础研究发现：①脑供血障碍和脑组 织损伤；②机体处于应激状态；③调节血管平滑肌舒缩功能活性物质水平显著化。 1．2肝阳化风证的核心学术论点“肝为风脏……内风(肝风)乃身中阳气之变动，因精血衰耗，水 不涵木，木少滋荣，故肝阳偏亢，内风时起”(清·叶天士《临证指南医案》)，即肝阳上亢一肝阳化风一 风火相煽一挟痰上扰一气血上逆一直冲犯脑一络破血溢；治法：平肝熄风、凉血泻火、行血化痰； 组方：平肝熄风汤，研制为“脑溢安颗粒剂”；药物：钩藤、丹皮、大黄、石决明、白芍、生地、地龙等。 1．3临床研究脑溢安颗粒主治：脑出血急性期(轻型、中型)；中经络G肝阳化风证，痰热腑实证)； 中腑(风火闭窍证)。疗效：总显效率(基本痊愈+显效率)80—82．8％，促进血肿吸收、神经功能恢复。 主要药效：改善脑出血大鼠瘫肢运动功能及平衡功能，促进血肿吸收，减轻脑水肿，减轻血肿周围及远区 神经细胞的缺血性损害；减轻缺血后氧自由基脂质过氧化脑损伤。 2 研究思路 2．1脑出血的病理生理机制 以脑缺血损伤为核心，脑溢安对脑缺血损伤的保护是本研究的起始的思 路。 2．2以中医学的整体观念为指导应用人与自然、机体内环境阴阳相对动态平衡观点，在各种病理损 害过程中，存在损伤因子和保护因子的相互激发过程。结合医学的前沿理论，选择NO生成、细胞凋亡作 为切人点，研究脑溢安对脑出血脑缺血损伤的保护机理能否对凋亡相关的损伤因子和保护因子起调节作 用。 (1)有关No过度生成的细胞毒作用 而且正常脑组织中，检测不到诱发型一氧化氮合酶(iNOS)，玳oS 表达后，其作用强力而持久，可产生大量的No，No一方面可调节血管的舒缩及微血管的通透性；另一方 面也可与过氧阴离子反应生成毒性更强的过氧亚硝基阴离子(ONOo一)，从而对脑组织产生直接损伤作用。 脑溢安能抑制iNoS酶活性及转录水平，并发现iNoS酶活性的增强时程与神经细胞超微结构病理改 变有着平行关系，说明脑溢安是通过抑制脑内iNOs的过度表达的细胞毒作用而使神以元得到保护。 期反应基因”，bcl一2是一种原癌基因，可抑制氧自由基，阻断脂质过氧化通路，抑制细胞凋亡。Bax基因 具有加速细胞凋亡作用。脑溢安抑制损伤的神经细胞DNA裂解，减少神经元凋亡数量，与光镜、电镜神 经细胞病理改变呈一致性。经测定，在培养的神经元中90％以上的细胞周期为Go／G1期，神经元缺糖损伤 后60rnin，神经细胞凋亡开始增加，脑溢安组神经细胞凋亡于3h达高峰(44．47％)，以后逐渐下降。 (3)脑溢安对脑缺血损伤神经元凋亡相关的损伤因子与保护因子的调节作用。脑溢安可上调bcl．2 rnJ刚A与蛋白的表达，下调baX表达，是抑制神经元凋亡的一个重要环节。 2．3脑出血脑内炎症反应及中药的抗损伤作用脑出血后，血肿血凝块中凝血酶、血红蛋白及降解产 物如 铁离子等对脑组织的毒性作用，引起强烈的炎症反应。 (1)有关在免疫和炎症反应中的损伤因子和保护因子： 显著高于正常健康人对照组。脑溢安治疗后能维持脑出血患者血清Ⅱ，6的恒定表达，TNF．a显著降低。说 398 明脑溢安在脑出血损伤发挥神经保护作用，抑制炎症因子损伤。脑溢安能稳定损伤神经元及大鼠脑出血后 脑内NGF 化酶活性，减少锥体神经元缺失，改善细胞有氧代谓}，增加细胞供能。 Adhesion (2)有关细胞间粘附分子一l(hltercellularMolecule一1，ICAM—1) 上IcAM—l等黏附因子表达上调，介导白细胞一内皮细胞黏附，阻塞微血管，减少血流量，促进循环白 细胞跨内皮迁移。脑溢安干预后脑内ICAM—l表达明显下调，相应区域白细胞浸润及神经损伤也显著减轻。 (3)NF-kB、姗、HSP70。 NF．1(B是一种能迅速对刺激产生反应的重要的转录因子，广泛存在真核细胞中，参与一系列炎症反应、 免疫应答、细胞增殖和凋亡等的基因表达调控。HSP70是生物细胞在各种应激状态下发生热休克反应所合 成的热休克蛋白。脑溢安能上调Ⅱ(Ba、HsP70的的表达，抑制NF-kB