PEI%2fMn0.5Zn0.5Fe2O4磁性纳米颗粒的制备与特征检测.pdfVIP

纳米材料 中国微米纳米技术学会第十一届学术年会 PEI／Mno．SZno．5Fe204磁性纳米颗粒的制备和特征检测 王子妤1，王丽2，张东生r l、东南大学临床医学院(南京210096) 2、东南大学基础医学院(南京210096) 锰锌铁氧体是近10年来发展起来的具有尖晶石结构的软磁铁氧体材料，由于其具有超 顺磁性，可强烈吸收电磁波能量而升温，从而用于肿瘤的热疗。近年来的研究发现，纳米磁 性材料还可以作为基因载体。由于纳米载体无免疫原性，无遗传毒性与细胞毒性，允许基因 缓慢释放，获得转基因的长期、稳定表达，并可实现多种靶向性，因此成为极具应用前景的 新型载体系统fl翻。本研究小组在前期的研究工作中成功研制出具有自主知识产权的磁性锰 锌铁氧体纳米颗粒(Mno．5Zno．5Fe204)，结果证实其制备简单，生物相容性优良，易于表面 进行表面修饰，并通过体外转染实验研究了其作为基因载体的能力。 方法：(DMno．5Zno．5Fe204由本室自制，配成质量分数为4％的磁流体，超声分散后高速离心 h，磁力搅拌2h， 弃上清。重悬于磷酸盐缓冲液中，边超声边缓慢加入PEI充分混匀，超声1 使反应充分形成稳定的PEI／Mn0．5Zno．5Fe204。用蒸馏水、乙醇反复洗涤，干燥后存放备用。 ②采用透射电子显微镜(TEM)观察其形貌和大小，傅立叶红外光谱分析修饰前后磁性粒 g／L 的磁流体，置于输出加热电流为300A的磁场中，测量磁流体温度随时间变化情况，绘制 升温曲线。④体外转染实验：人肝癌HepG2细胞按常规方法培养。细胞接种于6孔细胞培 min。在无血清和抗生素培养基下加入PEI／ 粒子与pEGFP质粒DNA充分混合，室温放置30 min。5 min，再置于强磁铁上进行磁性转染15 Mno．5Zno．5Fe204．DNA复合物，混匀放置30 小时后更换常规培养基，转染24～48h后荧光显微镜下观察。 结果：①TEM下PEFMno．5Zno．5Fe204纳米粒子大小约30．40nm，分散性良好(图1)。②红 cm．1 外光谱分析示：修饰前后纳米粒子的红外光谱图基本相同，但存在以下变化：在1471 cm．1 处、2826cm—l和2954cm．1处均出现了新的特征小峰，这分别是PEI的-NH2在1560 的剪切振动峰和．CH2．在2833cm．1和295lcm—l的非对称和对称伸缩振动特征峰的表现。该 结果证明了PEI在Mno．5Zno．5Fe204颗粒表面进行了吸附(图2)。③在输出电流为300A的条 ／＼HepG2细胞，转染24d时后即可见到绿色荧光蛋白(GFP)的表达(图4)。 不影响其升温性能。同时由于PEI在表面的修饰，可有效与DNA结合，并转移入肝癌细胞 内。本实验为PEI／Mno．5Zno．5Fe20。将来进一步用于肝癌的热、基因联合治疗提供了实验数 据。 (字数1023) 基金项目：国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2007AA032356)，国家自然科学基金资助项 目 +通讯作者：张东生，教授、博士生导师，工作单位：东南大学基础医学院。电话：025传真： 025email：b7712900@jlonline．com l A一1