产淀粉脱枝酶菌株Bacillus+sp.CICIM+B30的生长与产酶初步研究.pdfVIP

中国粮油学会第六届学术年会论文选集 377 产淀粉脱枝酶菌株Bacillus B30 sp．CICIM 的生长和产酶初步研究 李由然赵献春张梁丁重阳 王正祥石贵阳 (江南大学生物工程学院生物资源与生物能源研究中心 工业生物技术教育部重点实验室，无锡214122) 摘要 淀粉脱枝酶是淀粉加工过程中水解其1，6一糖苷键的水解酶，为淀粉彻底糖化所必需。本研 究对一株产淀粉脱枝酶菌株Bacillussp．CICIMB30的生长和产酶进行了初步优化，单因素影响实验显示，产 l 酶较适宜的培养基组成为：玉米糊精8g／L，牛肉膏12 mmoVL，NaCl g／L，Na2HP04一KH：PO。40 g／L，Mg— 0．5 SO。·7H20g／L，pH 倍，说明此条件较适合该菌株发酵产淀粉脱枝酶。其中碳源，氮源分别为玉米糊精和牛肉膏，葡萄糖，麦芽 糖，蔗糖，乳糖等不利于产酶。 关键词淀粉脱枝酶发酵优化 淀粉中，支链淀粉含量约占75％。Ot—l，6一糖苷键在支链淀粉中每20一25个葡萄糖残基就出现一个，因此 支链淀粉中含有大量的仪一1，6一糖苷键¨J。提高支链淀粉的利用率在许多产业中能够带来巨大的经济价 值旧J。能够水解淀粉中d一1，6一糖苷键的酶统称为淀粉脱枝酶(Debranching 一糖苷酶、普鲁兰酶、糖原水解酶、异淀粉酶等一J。在淀粉加工中，脱枝酶常常与其他淀粉酶如a一淀粉酶， 糖化酶等协同使用，使淀粉糖化完全。因此，脱枝酶广泛应用于发酵工业，可显著提高原料的利用率，降低粮 耗，提高产品质量及开发新的产品HJ。尤其在需求13益增长的酒精工业中，原料占总生产成本的70％，提高 J。 原料的利用率可直接降低燃料酒精的生产成本b 国际上对于脱枝酶的研究起步相对较晚【6J。在过去的十几年中，人们从为数不多的微生物中鉴定并纯 化了脱枝酶，这些微生物主要有Bacillusamyloliquefacieus，Pseudomonasamyloderamose，Cytophagasp．，Fla— vobacterium kononenkoae和Bacilluscirculans。我国所使用的脱枝酶几乎全部来自外国公司。因 sp．，Lipomyces 此，找寻新的脱枝酶，降低其生产成本并寻找一条国产化生产途径，对我国淀粉水解酶制剂及其淀粉为原料 的工业体系健康发展具有重要意义。本研究报道了一种新的产脱枝酶菌株Bacillussp．CICIMB30的生长和 产酶性质，为进一步的开发和应用奠定了基础。 1 材料与方法 1．1材料与试剂 菌种：Bacillus sp．CICIM jiangnan．edu．cn)。 10 种子培养基：蛋白胨10 g／L，葡萄糖30g／L，NaCl 7．0，高压蒸汽灭菌 g／L，酵母浸出汁5 s／L，pH 115。C，20min。 发酵培养基：玉米糊精8 40 1 g／L，牛肉膏12g／L，Na2HP04一KH2P04mmol／L，NaClg／L，MgS04．7H20 O．5 min。 g／L(单独灭菌)，pH6．0，高压蒸汽灭菌115。C，20 余试剂均为市售国产试剂。 378 中国粮油学会第六届学术年会论文选集 1．2摇瓶培养 将菌种