三维荧光光谱法研究桑色素与蛋白质的耦合反应.pdfVIP

26　　　 2005 ,No . 4 化学与生物工程 Chemi stry Bioengineering 三维荧光光谱法研究桑色素与蛋白质的耦合反应 张华新 , 颜承农 , 童金强 , 梅 　平 , 李克华 (长江大学化学与环境工程学院 , 湖北 荆州 434023) ( ) ( ) 　　摘 　要 :在模拟人体生理条件下 ,采用三维荧光光谱和紫外 - 可见吸收光谱研究了桑色素 Morin 与牛血清 白蛋白 B SA 的耦 合反应 。试验表明 ,Morin 对B SA 的内源荧光有较强的猝灭作用 。分析试验数据发现 ,B SA 与 Morin 之间耦合形成了复合物 ,该猝 灭作用属于静态荧光猝灭 ,伴随着分子内的非辐射能量转移 。计算得到了室温下 Morin 与 B SA 的耦合常数 、结合位置 、结合位点 数等 。简要讨论了 Morin 对 B SA 构象的影响并试图从分子水平上探讨 Morin 的药理活性与环境及 自身浓度之间的联系 。 关键词 :三维荧光光谱 ;桑色素 ;牛血清白蛋白;吸收光谱 ;耦合反应 中图分类号 :O 6573 　Q 512 　　　　文献标识码 :A 　　　　文章编号 :1672 - 5425 (2005) 04 - 0026 - 04 　　蛋白质和核酸是两类重要的生物大分子 ,许多外 验用水为二次去离子水 ,经检测均无荧光杂质 。 源性小分子 、离子能与它们耦合 ,形成更加复杂的化合 12 　方法 物 ,直接或间接地发挥着规范或改善机体生命活动的 在 10 mL 比 色 管 中 依 次 加 入 20 mL 作用 。药物等小分子与蛋白质 、核酸等生物大分子相 05 mol ·L - 1 N aCl 溶液 、20 mL B SA 溶液 、20 mL 互作用 的研究引起 了人们 的极大关注[ 1 ] 。桑色素 Tri sH Cl 溶液及一定量的 Morin 溶液 , 以二次水定容 (Morin) 是一种天然黄酮类化合物 , 是一种有效的中 为100 mL ,摇匀 ,静置一定时间。当激发和发射单色 药成分 ,具有一定的抗菌 、抗病毒 、抗氧 、抗肿瘤及抗癌 器狭缝宽度分别为15 nm 、25 nm 时 ,分别在一定的激 活性[2 ] 。近年来 ,桑色素与 DN A 的相互作用已有研 发和发射波长范围内,扫描 B SA 及 B SA 在 Morin 作 究[3 ] ,其与蛋白质作用的特征研究尚未见报道 。作者 用后的三维荧光光谱 ; 当狭缝宽度为1 nm 时 ,于一定 通过模拟人体生理条件 ,采用三维荧光光谱和紫外 - 波长范围内扫描各样品的紫外 - 可见吸收光谱 。 可见 吸收光谱 法研 究 了 Morin 与牛血清 白蛋 白 2 　结果与讨论 (B SA) 耦合反应的光谱特征 ,得出了 Morin 与 B SA 的 耦合常数 、结合位置 、结合位点数等 ,探讨了荧光猝灭 2 1 　Morin 及 Mor