嗜酸热硫化叶菌麦芽寡糖基海藻糖合酶基因的克隆和表达.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’() * ! +( * # 年 月 $%%! !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 ,-. $%%! !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 嗜酸热硫化叶菌麦芽寡糖基海藻糖合酶基因的克隆和表达 ! ! ! $ 王 辉 陈 炜 吴 襟 金 城 ! （中国科学院微生物研究所 酶学研究室 北京 !%%%1% ） $ （中国科学院微生物研究所 微生物资源前期开发国家重点实验室 北京 !%%%1% ） 关键词 麦芽寡糖基海藻糖合酶，嗜酸热硫化叶菌，基因的克隆和表达，大肠杆菌 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） B1 C !%%%/#%5! $%%! %#/%##0/%# 麦芽寡糖基海藻糖合酶（ ； 苄青霉素和卡那霉素的浓度都为 。重组菌株的培 ,-)D(E:F(@.)DG4H-)(@4 @.DH-@4 !%% FW9U ,3I-@4）是近年来在一些微生物中发现的新型分子内糖苷转 养温度为#%X ，培养至 675%% 为% Y5 时左右调节温度为2$X 移酶，能将淀粉或淀粉部分水解物（大于 个葡糖基）的糖链 开始诱导，诱导时间为 。摇床转速为 。酶活力测 # 2H $%GW9: 还原末端的 ，糖苷键转化为 ，糖苷键，生成具海藻 定方法，参照文献［］进行。 /! 2 /! ! # ! ! ［］ 糖末端结构的产物! ，如下所示： 辅助质粒OQPI$% 转入受体菌方法：将重组菌株用文献 ,3I-@4 ［］的方法制成感受态细胞，转入 质粒，然后用氨苄 5 OQPI$% J # JK$ K 3 青霉素和卡那霉素的双抗性培养基筛选出双抗性的重组菌 J 为聚合度 （ ）的麦芽寡糖， 为麦芽寡糖 L # J K $ K 3