河蟹细菌病病原分离与鉴定.pdfVIP

第28卷 第2期 水 产 养 殖 V01．28 No．2 2007年3月 1日 JournalofAquaculture March 1，2007 河蟹细菌病病原分离与鉴定 祖 国掌，李槿年，余为一，杨启超 (安徽农业大学动物科技学院，安徽 合肥 230036) 摘 要：1999-2004年对安徽省巢湖市境内8个乡镇的1300hmz池塘、稻田养殖的中华绒螯蟹细菌性疾病进行了研究。结果表 明：中华绒螯蟹细菌性疾病主要出现 “颤抖”、“黑鳃”、“肝腺糊化”、“腹水”和 “烂肢或腐壳”等5种常见病症；从患病蟹体内分离、鉴定出 嗜水气单胞菌、粪产碱菌、少动假单胞菌、反硝化产碱菌、产吲哚黄杆菌、产碱假单胞菌和苏云金芽孢杆菌等7株病原菌。 关键词： 河蟹；养殖；病原菌；细菌性疾病 中图分类号：$947 文献标识码：A 文章编号： 1004—2091(2007)02—0001—04 中华 绒螯 蟹 (Eri0cheirsinensisH．Milne． 分别注射感染25组河蟹，每组7只，每只河蟹均从 Edwards)俗称河蟹，是珍贵的淡水名贵水产品，规格 第三步足的座节间隙软组织慢慢注人0．1mL菌悬 大的商品蟹市场售价一直较高，因此 ，河蟹养殖常 液 (活菌数 108个 ／mL)，另外 2组分别注射无菌蒸 出现升温的态势，发展速度快。随着河蟹养殖业的 馏水和无菌培养液作为对照 ，注射后的每组河蟹 迅速发展，疾病的危害也随之严重起来 ，并造成了 分别放在规格为 36cmx28cmx15em的塑料盆中， 巨大的经济损失 l『’2]。安徽是养蟹大省，河蟹细菌性 每个盆内放置水花生 500g，水深 10cm，每天下午 疾病同样严重困扰着河蟹养殖业的健康发展 3『】。 17：00定时换水，连续 15d每隔6h观察 1次，记 1999～2004年，对安徽省重点养蟹区的池塘与稻 田 录死亡数量和症状。 养殖环境下多例河蟹细菌性疾病进行了诊断、病原 1．4 病原菌的鉴定 分离与鉴定 ，目的是为分析河蟹细菌性疾病的致病 将人工感染致河蟹死亡的细菌进行革兰 氏染 原因，帮助蟹农更有针对性地防治这类疾病提供参 色，若为革兰 氏阴性杆菌 ，则采用哈尔滨海峡医药 考和帮助。 科技集团生产革兰 氏阴性杆菌四位编码鉴定系列 1 材料与方法 培养基 (专利号为：CN1162646A)进行编码鉴定，初 1．1 病蟹来源与处理 步确定其种属 。若为革兰氏阳性菌则使用杭州微 诊断的病蟹来 自巢湖市境 内四个县 、区8个乡 生物试剂厂生产的生化微量发酵管进行生理生化 镇 1300hmz养蟹区域蟹农送至实验室和现场采集 特性测定，初步鉴定细菌的种属。 带回实验室两条渠道。在实验室，首先置病蟹于塑 2 结果 料盆或水族箱，记录症状特征，并将症状近似的病 2．1 严重病症的特征 蟹归类、编号，用作病原菌分离。 依据多例病蟹异常活动状态，鳃丝、肝胰腺等 1．2 细菌分离 器官组织的病变特征以及腹腔是否积水等症状归 将病蟹经 自来水冲洗干净，无菌操作取肌肉、肝 类，河蟹细菌病常见 “颤抖”、“黑鳃”、“肝腺糊化”、 脏和心血划线接种普通营养琼脂平板28℃培养 24h 腹“水”和 烂“肢或腐壳”等5种典型病症。 后，挑取优势菌落再接种普通营养琼脂平板 2次，纯 2．2 病原茵 化后的细菌保存于4℃冷藏柜