Syntaxin1A%2fPOPC%2fPOPS膜蛋白脂质体的固体NMR的研究.pdfVIP

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209 PBl2 7周东华p,李开1,杨俊1,冯继文1‘ 王立英l,林鹏辉2,段练2 n.中国科学院武汉物理与数学研究所波谱与原子分子国家重点实验室,武汉磁共振中心,武汉430071; 2.美国奥克拉荷马州立大学物理系,奥克拉荷马74078) SyntaxinlA是特异性分布在神经细胞突触前质膜上的蛋白,属于神经突触囊泡融合必要 因子的SNARE核心复合体的一个蛋白质成员【11。它是一个多结构域蛋白,能与多个突触蛋 白相互作用(如其他SNARE组分蛋白、Muncl8和钙离子通道等),在囊泡的运输、入坞和/ 或融合中起着至关重要的作用。然而,该蛋白发挥功能的机制目前尚不清楚,还有待于对其 三维结构及与磷脂膜相互作用的进一步研究。 SyntaxinlA的疏水性很强,在溶液中非常容易聚集,同时很难结晶,从而使得x一射线晶 体学方法和液体核磁共振(NMR)技术研究该类体系非常困难。而固体NMR技术在研究这 类膜蛋白体系时具有独特优势,可以直接研究膜蛋白在磷脂双分子层环境下的三维结构及其 与磷脂膜的相互作用特性,这种膜的天然环境是膜蛋白实现其功能的必要条件‘21。 本项工作中,我们拟利用固体NMR技术研究SyntaxinlA蛋白脂质体的三维结构以及 同位素标记SyntaxinlA膜复合样品并对其进行了初步的固体NMR研究。 kDa kDa l 97l潮_一 97 66i穆㈣ 66 纯化后与45|斓黼 45 LUV结合 | —·_一31妒 31 雷 21赣够 21 舞,。。.. 似黪 鞭-辱—一 14 图1.2H,13C,15N—SyntaxinlA的表达、纯化SDS—PAGE图,蓝色 箭头标示出目标蛋白的条带. 1.SDS—PAGEcharacterizationOilthe and Figure expression purificationof2H,13C,15N—SyntaxinlA. 。通讯联系人:冯继文,E-mail:j型鱼坠g@型iP堡!堑:£旦; 210 PBl2 Purificationandsolid—state NMRcharacterization of SyntaxinlA/POPC/POPS Proteoliposome Lin2,Lian Liyi聆gWan91,PenghuiDuanz,DonghuaZhou2.,KaiLil,Jun Yan91,JiwenFengI’ andAtomic (1.StateKeyLaboratoryofMagneticResonance

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