鸡FSHR基因5%27调控区两个多态位点及其和产蛋性状的相关研究.pdfVIP

2010，VOLUME12，NO．1ANIMALB10TECHNOLOGYBULLE下IN 5 鸡FsHR基因5 7调控区两个多态位点及其与产蛋性状的相关研究 康丽1，严华祥2，臧丽‘，梁森1，张渝洁1，刘东君1， 张宁波1，唐辉1，王慧1，杨长锁2，姜运良1 (1山东农业大学动物科技学院，泰安271018；2上海家禽育种有限公司，上海201901) 引言 促卵泡素(FSH)是调控动物繁殖活动的重要激素之一，对动物卵巢卵泡的生长、发育、 分化、成熟和排卵更起着必不可少的作用，其生物学功能的发挥通过位于靶细胞膜上的促卵 泡素受体(FSHR)介导。研究表明FSHR基因57端多态位点的基冈频率，在产双胎和产单胎 mRNA 的中国西门塔尔牛群体中差异显著。多胎罗曼诺夫羊发育卵泡颗粒细胞中的FSHR 水平均显著高于单胎法兰西岛羊。目前，有关FSHR基因5’端的研究主要集中在人和哺乳 动物，在禽类仅有报道产蛋鸡FSHR在成熟卵巢不同等级卵泡膜细胞和颗粒细胞上的表达， 而有关鸡FSHR基因5’调控区序列多态性及其与产蛋性状关系的研究尚未见报道。 材料方法 选择济宁百日鸡36只，文昌鸡349只，藏鸡29只，罗曼褐37只，鲁禽141只，新杨 褐101系390只，以及新杨褐杂合亲本的后代204只，共计六个鸡品种1186个个体，分别 采用PCR—RFLP及PCR方法对鸡FSHR基因5 7端．237位点A／T突变和．868位点的200 bp Indel突变进行了基冈分型和单倍型的检测以及与产蛋性状的关联分析。用实时荧光定量 PCR技术对突变位点TTG+G+、TTG+G．和TTG．G．三种不同基因型间FSHRmRNA的表达 外转染鸡的卵泡颗粒细胞，利用双荧光素酶报告基因检测系统对其启动基因表达的效率进行 了分析。用TFSEARCH1．3软件对．237和．868突变位点潜在转录元件进行预测。 结果 ．237位点，在文昌鸡、济宁百日鸡等地方品种中A等位基因和T等位基因频率相差不 大，而在罗曼褐和新杨褐高产蛋品种中，则以T等位基因占优势。．868位点200 bp缺失型 (G-)频率在地方品种占优势，达90％以上，而插入型(G+)频率则在罗曼褐和新杨褐中 占优势：TG+单倍型在高产蛋品种中为优势单倍型，推测其可能对高产蛋量有正效应。关联 分析结果表明，文昌鸡群体单位点多态与39w产蛋数(E39)和开产日龄(舡E)相关不显 d)， 著，两位点双倍型分析结果与开产日龄相关密切，TTG+G．对应较小的开产日龄(123 TT㈣对应较大的开产日龄(134d)，两者差异显著(P=O．016)。新杨褐群体在．237位点 均为纯合TT型，此时一868位点与37W产蛋数(E37)和开产日龄(AFE)相关显著，TT㈣ 基冈型也对应较大的开产日龄(162d)和较高的后期总产蛋数；荧光定量结果表明，TTG“H 基因型FSHRmRNA在产蛋高峰期卵巢包卵泡中的表达量最高(P0．05)。荧光素酶的分析 1．3软件预测结果显示，在．868位点200 在一237位点，当该位点由T突变成A时，会减少一个Bm．2转录因子结合位点。 讨论 人、鼠、牛、羊等的研究表明，FSHR基因5’调控区的突变会影响该基冈表达从而影 响到繁殖性状。本研究发现鸡FSHR基因5’调控区两个突变位点对开产日龄影响显著， TTG+G+基因型在两品种中均对应着较大的开产日龄。本研究AG．单倍型具有较高的启动 效率，且在开产较早的地方品种中的频率较高，AG．单倍型是否与早开产有关值得进一步 研究。TTG叫抖基因型FSHRmRNA在产蛋高峰期卵巢白卵泡中的表达量最高，且TG+单 倍型在高产群体中频率较高，其可能对高的产蛋数有正效应。在两个突变位点存在多种转录 因子结合位点，近来许多研究表明，GATA家族成员参与调解整个繁殖轴正常的功能表达。 研究证明