4℃储存条件下不同组织保存液对皮片活力影响地研究.pdfVIP

4。C储存条件下不同组织保存液对皮片活力影响的研究 解放军304医院烧伤研究所临床部贾晓明 加拿大阿尔伯塔大学医学院低温医学实验室 McGann H．Yang，K．Liss，L．E 加拿大阿尔伯塔大学医学院整形烧伤科E．E Tredget 保存良好活力的异体皮是当今临床上救 治太面积烧伤病人创面覆盖的有教治疗措施 之一。在普通冰箱(4℃)条件下储存皮片的方 法简便易行，并早已在全国各大中医院内广 uw换液组(UW--R)。其中实验换液组为每 泛实行，但困其储存后活力降低较快，储存时 48小时定期更换保存液。 间不能持久，因而极大地妨碍了临床上植皮 本实验采用的MEM溶液为美国GI＆ 治疗的需要。为此．在我院以往开展4‘c条件 Sul— CO公司出品，硫酸软骨素(Chondroitin 下储存皮片研究的基础上，作者就当今临床 上应用的一些不同组织器官(肝、肾、角膜)异 UW--CSS(DupontCanada Ine)。将0．3ram 体移植前在45c条件下的保存液，以探索这 断层皮片置于空气层流台内，在无菌条件操 些组织保存液，在相应条件下储存皮片后其 作下，分别剪成20×30ram2面积大小，按 活力变化的影响，摸索出一种或几种在4’c 2cm2皮片面积／每ml保存液的比例，将每个 条件下储存皮片的最佳保存液，为进一步改 实验组的3．oral保存液，分别加到各自实验 进与提高4℃条件下储存皮片的方法与活 组中1、3、5、7、10、14天各个时间点的无菌密 力，提供实验依据。 封玻璃瓶内，尔后将盛有各时相点的备实验 材料与方法 组皮片小瓶存放于4C冰柜(美国产)内待 一、标本来源及采取方法 检。 雄性加拿大小型猪，30kg左右，固定于 三、皮片活力测定 手术台上，于气管内插管静脉全麻下，肥皂水 本实验活力指标采用当今新的细胞组织 副洗后刮毛，0．5％碘伏溶液捎毒后铺无菌 活力检测方法——WST—I法(新型四氮唑 单，电动取皮机(美国产)沿猪背及腹部两侧 依次分别取下条片状断层皮片(0．3mm厚Mannheim公司，检测方法为，将每实验维各 度)，尔后将取下的数块皮片浸泡于 时相点待检的皮片，从4C冰柜中的玻璃小 瓶内取出，在室温条件下，PBS液(GIBC0公 1000mlMEM溶液(GIBCO公司)内无菌罐 内备用。 司)冲洗三遍，用皮冲子冲成直径约10× 二、实验分组与皮片处理 10ram2大小既形皮片，每实验组各个时相点 实验分为五组：①MEM不换液组 的皮片分别为6块检测，然后将每小块皮片 ·112· 分别置于96孔无菌塑料培养皿内， 四、实验数据统计学处理 20“I的比例加人每孔 本实验中数据均经SDAS统计软件在 PBS200p1+WST一1 内，3TC，CO，孵箱内3小时，去除培养孔内微机上处理，包括F检验，SNK法q法检验， 皮片，保留培养液体，应用双波长酶联仪在 各实验组指标均以X士S表示，分别以新鲜 450／690nm波长下检测每个培养孔内皮片皮片组为各实验组的正常对照，P0．01