产喹诺里西啶碱苦豆子内生真菌的筛选与鉴定.pdfVIP

第34卷第1期 农业科学研究 2013年3月 of Sciences Mar．2013 V01．34No．1 Journal Agricultural 文章编号：1673—0747(2013)01-0028—05 产喹诺里西啶碱苦豆子内生真菌的筛选与鉴定 周星辰，郝丽，张伟，顾沛雯 (宁夏大学农学院，宁夏银川 750021) 摘 要：从健康苦豆子植株中分离到214株内生真茵，通过薄层色谱法检测筛选到4株内生真菌产喹诺里西啶碱． 用3种培养基分离菌株，根据菌株的茵落形态、大小、颜色、生长速率、质地、生长培养基颜色变化以及茵丝体和孢 镰孢霉属(Fusarium)和头孢霉属(Cephalosporium)． 关键词：苦豆子内生真菌；喹诺里西啶生物碱；筛选；鉴定 中图分类号：S182 文献标志码：A 纯化，用薄层色谱法(thin 1993年，Stierle[13首先从短叶红豆杉的韧皮部 layer 中分离到1株能产紫杉醇的内生真菌．随后研究者 TLC)对所得菌株进行产喹诺里西啶碱筛选．得到4 在多种植物中分离到能产生与宿主相同或相似生理 株产喹诺里西啶碱菌株，并对其进行初步鉴定，为进 活性代谢产物的内生菌[2]．如2001年，Li[31等从美一步研究提供菌株材料． 洲榧中分离内生真菌Pestalotiopsismicrospora和 1材料与方法 Monochaetia sp．，可以产生与宿主相同的粗榧酸． 近几年的研究表明，宿主植物与内生菌常具有相同 1．1 材料 或相似的次生代谢产物合成途径[4--6]． 采集宁夏灵武白芨滩自然保护区新鲜健康野生 苦豆子(Sophoraalopecuroides)为豆科槐属植 苦豆子植株和种子．苦豆子粉由宁夏盐池县都顺生 物，主要分布于我国北方的荒漠、半荒漠地区．其主 物化工有限公司生产． 要药用成分是喹诺里西啶碱[7_9j，具有清热解1．2培养基 毒[6-7]、驱风燥湿[8_1¨、抗菌杀虫[12叫3|、抗肿瘤、提 分离培养基为固体马铃薯葡萄糖琼脂培养基 高免疫力[6’1u等多种生理活性，是克泻灵、止痢宁、 妇炎栓、苦生素注射液等多种药物的主要原料，需求 (PJA)．发酵培养基为液体马铃薯葡萄糖培养基． 量很大n]．国内获得苦豆子活性物质的主要方法是 PDA培养基：在配制过程中加入p(氯霉素)一 直接从植物中提取，通过刈割苦豆子来利用．苦豆 50．mg／mL，抑制细菌生长．121℃高压蒸汽灭菌 20 子野生资源有限，滥采滥用将导致其枯竭，甚至野 rain，备用． 生草场沙化，影响生态平衡[12_13|．另一方面，由于 OA培养基：将20g燕麦片在研钵里加水研磨 000 其生长比较缓慢这一生物学特性使得苦豆子的人 至糊状，然后加18g琼脂和1 mL蒸馏水定容， 工栽培不经济[I“．因此，从苦豆子中筛选能产生类 分装灭菌． 似苦豆子活性物质的内生菌是长足发展的重要途 PJA培养基：将50g沙生药用植物的T叶在研 3I． 径之一[1