5-脂氧酶-绿荧光蛋白转染评价PC12细胞损伤后5-脂氧酶核膜移位.pdfVIP

第! 卷# 第$ 期 浙江大学学报（医学版） 4; !# +; $ $%% 年 ’()*+,- (. /01’2,+3 )+241*5267 （8192:,- 5:21+:15 ） $%% LNNO ： GGGA P;QRSETA UPQA HVQA MS W DHV ! @ = 脂氧酶W 绿荧光蛋白转染评价X:$ 细胞 损伤后@ = 脂氧酶核膜移位 袁玉梅，李成檀，马振秋，彭# 芳，张纬萍，魏尔清 （浙江大学医学院药理学教研室，浙江杭州!%%@C ） ［摘# 要］# 目的：通过绿荧光蛋白（YRHHS ZQ;RHTMHSMH OR;NHFS ，3.X ）W @ = 脂氧酶（@ = FO;[KYHSETH ，@ = -(\ ）稳定转染X:$ 细胞，以可视化方法观察@ = -(\ 在不同损伤后的变化。方法：将带有@ = -(\ 基因的O13.X = :$ 质粒及O13.X = :$ 质粒（对照），稳定转染至X:$ 细胞；在缺糖缺氧（;[K] YHS = YQM;TH VHORF^ENF;S ，(39 ）、0 ( 和+89, 处理后，荧光显微镜下观察3.X W @ = -(\ 在细胞内 $ $ 的定位；同时，以免疫细胞化学方法观察野生型@ = -(\ 分布及其变化。结果：转染3.X W @ = -(\ 的细胞内，3.X W @ = -(\ 主要均匀表达于细胞核内；仅转染3.X 的细胞 3.X 表达于胞核和胞浆。 (39 和0 ( 处理后，分别有@%A _ 和@A _ 细胞的3.X W @ = -(\ 移位到核膜；+89, 处理或仅转 $ $ 染3.X 的细胞，未见核膜移位现象。野生型@ = -(\ 分布在细胞核和细胞浆内，! 种损伤处理均诱 导核膜移位。结论：稳定转染3.X W @ = -(\ 的X:$ 细胞，3.X W @ = -(\ 主要分布在细胞核；不同损 伤处理诱导的@ = -(\ 核膜移位，有不同的特点。 ［关键词］ # 花生四烯酸盐@ = 脂氧合酶W 生物合成；X:$ 细胞；发光蛋白质类；转染；缺糖缺氧； + = 甲基= 9 = 门冬氨酸；过氧化氢 ［中图分类号］# ‘ $@ ；‘ ?$ # ［文献标识码］# , # ［文章编号］# %%C = B$B$ （$%% ）%$ = % = % !#$%’()*+$ ,*)- . / 0*1+234’$#%’ 5 4’’$ 06+’%(’$(’ 1+)’*$ + ’7#06#8 )*$4 *$963 / *$:6(’: . / 0*1+234’$#%’ )#$%0+(#)*+$ )+ )-’ $6(0’# ;’;8 #$’ *$ =?@ (’00% 7),+ 7Q = DHF ，-2 :LHSY = NES ，8, /LHS = IFQ ，HN E （!#$%’( )* +,$%’$-).)/0 ，1)../ )* 2345 -4( ，6,74$(/ 8(49%:40 ，;$(/,)= !%%@C ，1,4($ ） ［ A%)#() ］# B9’()*7’ ：6; H^EQENH NLH NREST;MENF;S ;Z @ = FO;[KYHSETH （@ = -(\ ）EZNHR FSPQRFHT aK NRESTZHMNF;S GFNL YRHHS ZQ;RHTMHSMH OR;NHFS （3.X ）W @ = -(\ FS X:$ MHTA C’)-+:% ：X:$ MHT GHRH TNEaK NRESTZHMNHV GFNL O13.X = :$ W @ = -(\ （3.X W @ = -(\ ）;R O13.X = :$ ^HMN;RT （M;SNR; ）A ,ZNHR NRHENDHSN GFNL ;[KYHS = YQM;TH VHORF^ENF;S （(39 ），0$ ($ ;R +89, ，3.X W @ = -(\ ;MEFUENF;S FS NLH MHT GET ;aTHR^HV QSVHR E ZQ;RHTMHSMH