【智慧测评】高考生物人教版总复习课件：选修第讲微生物的利用.pptVIP

二、微生物的利用 1．培养基的种类 　(1)按物理状态分类 　(2)按功能分类 2.消毒和灭菌的比较 3.微生物的营养 4.纯化大肠杆菌以及菌种的保藏 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。 (2)纯化大肠杆菌 ①原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 ②方法：平板划线法、稀释涂布平板法。 平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面；稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 (3)菌种的保藏 ①短期保存：固体斜面培养基上4 ℃保存，菌种易被污染或产生变异。 ②长期保存：－20 ℃甘油管在冷冻箱中保藏。 [特别提醒]　平板冷凝后，培养皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的温度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发；又可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 1. (2013·辽宁大连双基测试)下列是有关微生物的培养与应用的问题，请分析回答。 (1)如图是利用________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步________分散到培养基的表面。图中右手拿的器具称为________。 (2)分析下面培养基的配方；NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、H2O。若用于培养纤维素分解菌，应加入________(物质)，为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入________染料。 (3)获得的菌种如果需要长期保存，可以采用________的方法。 答案：(1)平板划线　稀释　接种环　(2)纤维素粉　刚果红　(3)甘油管藏 1．筛选菌株的原理 微生物的选择培养：在选择培养基的配方中，把尿素作为培养基中的唯一氮源，原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 2．统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法： ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。 ②方法：用计数板计算。 ③缺点：不能区分死菌与活菌。 (2)间接计数法(活菌计数法)： ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②操作： a．设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 b．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 ③计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。 3．实验流程 [特别提醒]　由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。 2．自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。 实验步骤： (1)制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。 (2)为了得到更加准确的结果，你选用________法接种样品。 (3)适宜温度下培养。 结果分析： (1)测定大肠杆菌数目时，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是______，其理由是____________________________________。 A．一个平板，统计的菌落数是230 B．两个平板，统计的菌落数是220和260，取平均值240 C．三个平板，统计的菌落数分别是210、50和520，取平均值260 D．四个平板，统计的菌落数分别是210、300、240和250，取平均值250 (2)一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的菌落数是________(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)。 (3)用这种方法测定的大肠杆菌密度，实际活菌数量要比测得的数量________，因为_____________________________________________。 解析：本题考查微生物的计数方法，可从两种接种方法的优缺点和统计菌落数目时应注意的问题入手解答该题。为了得到更加准确的结果，应用稀释涂布平板法接种样品。(1)选取多个菌落数相差不大的平板计数，取其平均值。(2)234÷0.1×105＝2.34×108。(3)因为菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多。 答案：实验步骤：(2)稀释涂布平板 结果分析：(1)D　在设计实验时，一定要涂布至少三个平板作为重复组，才能增强