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总RNA提取方法的比较与分析.pdf
25 Vol. 25
2009 12 WUY I SCIENCE JOURNA L De . 2009
: 100 14276( 2009)
RNA
*
, , ,
(福建农林大学生命科学学院, 福建 福州 350002)
: TRIZOLCTA B RNA,
RNA OD260nm /OD280nm 1. 8961. 992 1. 657,
RNA , TR IZOL RNA , CTAB RNA ,
CTAB RNA
: RNA; ; CTAB
: Q522 : A
RNA, N orthernDNA
DNA RNA[ 1- 12] RNA
, , , ,
[ 2]
RNA , RN aseRNase
[ 7] [ 8]
mRNA RNA
[ 9] [ 10] [ 3] [ 4]
L iC l- Gomez CTAB
[ 5] [ 13]
TR IZOL TR IZOL CTAB
, RNA ,
1
1. 1
, - 70
( DEPC)TR IZOL
0. 1% DEPC, 200 6 h; , 0. 1% DEPC
, 1. 034 10 Pa 30 m in, DEPC, ,
1. 034 10 Pa30 m in, 3% 2 h, 0. 1% DEPC
; /( 1: 1) 1 h
1. 2
[ 13]
TR IZOL : 50 mg 1mL RNA isoReagent,
: 2009 - 03- 10
: * 福建省自然科学基金项目( 2007J0243, X0750005)福建省教育厅科技计划项目( JA07059)
: 林玲, 女, 1982( - ) , 助教, 研究方向: 微生物学与分子生物学方 的教学与科研工作
* : E - ma i:l w shyyl@ sina. om
98 24
5 m in; 200 L, 5 m in; 12000 g4 10 m in
, , , 10 m in; 12000 g4
10 m in 75% 1 mL ; 12000 g4 5 m in,
[ 4] [ 5]
; 30 L DEPCCTAB
DNA : RNA 4 L, O ligo- d ( T ) 18 1 L, ddH2O 5 L; 95 10 m in, -
20 5 m inRNA ( Rnase) 1 L, 5 T aq PCR Buffer 5 L, dd
H2O 7 L, dNTP1 L, ( AMV ) 1 L, 25 L, 48 1 h
RT - PCR: A tin, Prmi er 5. 0
: P1: 5 - CGTCTGCGATAATGGAACTGGTA - 3,P2: 5 - AACTTT
GTCCACGCTAATCAAGAA- 3
PCR : 5 PCR Buffer 4 L, d NTP 0. 5 L, 1 L , D
NA 2 L, T aq 0. 5 L, 25 LPCR: 94 5 m in,
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