基因芯片技术研究进展及其应用.pdfVIP

《上海畜牧兽医通讯》　2009 年第 6 期 ·27 · 基因芯片技术研究进展及其应用 1 ,2 1 ,2 孙国波 　　董 　飚 ( 1 江苏畜牧兽医职业技术学院　江苏 泰州 　225300 　2 国家级水禽基因库 　225300 ) 　　分子生物芯片分析是上世纪 90 年代初发展起来的一门 探针/ 基因片段的硅片 、玻片 、塑料片 〔5 〕。探针 DNA 是指被 新兴技术 , 已被美国科学促进会列为 1998 年 自然科学领域 有序地点样固定在玻片或硅晶片上的 DNA 片段 ,这些片段 十大进展之一 〔1〕。对疾病的诊断、预测 、药物筛选 ,基因测序 可通过 PCR 反应扩增细菌质粒上插入的基因组片段或用通 以及在农业 、环境保护 、司法鉴定等方面都具有广阔的应用 过引物从 cDNA 文库种 PCR 扩增得到 。这些大小和序列不 前景 ,是继大规模集成电路之后的又一次具有深远意义的科 同的片段分别经过纯化后 ,被高密度有序地点样固定在玻片 〔2 〕 学技术革命 。最初的生物芯片是指基因芯片 ,是由 Fodor 或硅晶片上从而制备成 DNA 微阵列 ,用于检测待测样品中 等在 199 1 年提出的。当前研究和应用最多的分子生物芯片 是否有与之互补的序列 。待测样品中的 mRNA 被提取后 , 是基因芯片 〔3 〕。 通过反转录反应过程获得标记荧光的 cDNA ,与包含上千个 1 　基因芯片的基本概念和原理 基因的DNA 微阵列进行杂交反应 ,将玻片上未互补结合反 1. 1 　基因芯片的基本概念 应的片段洗去 ,再对玻片进行激光共聚焦扫描 ,测定微阵列 ( ) 上各点的荧光强度 ,推算出待测样品中各种基因的表达水 基因芯片 gene chip 又称 DNA 芯片 ,是专 门用于核酸 检测的生物芯片 ,也是 目前运用最广泛的微阵列芯片 。它是 平 。若要比较不同的两个细胞系或不同组织来源的细胞中 指在固相载体上按照待定的排列方式固定上大量序列已知 基因表达的差异 ,则从不同的两个细胞系或不同的组织来源 的DNA 片段 ,形成 DNA 微矩阵 〔4 〕。 中提取 mRNA 。反转录反应过程中标记上不同颜色的荧光 , 1. 2 　基因芯片的基本原理 等量混合后 ,与包含上千个基因的 DNA 微阵列进行杂交反 所谓基因芯片就是按特定的排列方式固定有大量基因 应 ,对玻片进行激光共聚焦扫描 。比较两种荧光在各点阵上