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学术论文 (Ynlna Fi嚼A口rk舳alBbt。c|咖yD劓eI叩mentsymp0Bi姗 新微生物农药抑霉菌素的研究 施跃峰桑金隆竺莉红李孝辉 昊吉安 (浙江省农业科学院微生物研究所,杭州 310021) 摘要抑霉菌素产生茵经形态学特征及生理生化特性等分类学研究,定名为刺孢吸水 H CNMR及H—H 链霉菌天目山亚种。主要活性组分经UV、1NMR、DEPT COSY等光谱 分析论证,推知其化学结构系一新的核苷类抗生素。采用二倍稀释法对其展开体外抗茵活 性研究,结果表明抑霉菌素对白色假丝酵母、担子茵、圆形刺盘孢等多种农作物真菌病害病 原菌具有强生长抑制作用。 关键词抑霉菌素;菌种鉴定;化学结构;抗菌谱 抑霉菌素是我们筛选到的一种新的农用抗真菌抗生素。经国家“863”计划立项资助,已完成新农 药开发多方面基础研究,表现出高效、安全的特点。本文报道抑霉菌素产生菌分类鉴定、活性物质分 离、结构论证及体外抗菌活性研究等方面的试验结果。 一、材料与方法 (一)产生茵分类鉴定 抑霉菌素产生菌菌株HA一8416,分离自杭州天目山地区土壤。其形态学特征及生理生化特性 等分类学研究,采用《链霉菌鉴定手册》等文献所述方法进行口~。 (--}活性物质分离和化学结构 阳离子交换树脂采用杭州争光化工厂生产,型号001×7;硅胶采用青岛海洋化工厂生产,H型, 100目;1HNMR、DEPTCNMR及H—H AM一500核磁共振 COSY均采用D20作溶剂,在Varian 仪上进行测绘。 (三)体外抗菌活性研究 28℃培养48h,观察结果。 二、试验结果 (一)产生菌分类鉴定 HA一8416菌丝及孢子形态见图1和图2。与链霉菌属相关已知种比较,与不吸水链霉菌 水,HA一8416有吸水现象;吸水链霉菌孢子表面光滑,而HA一8416的孢子表面有细刺。它与刺孢 ·233· 中国首届农业生物技术发展论坛文集 ChinaFirst AgriculturalBDo-technologyDevelopmentSymposium 1),所产生的抗生素也不同。因此,菌株HA一8416应属刺孢吸水链霉菌的亚种,命名为刺孢吸水链 var 霉菌天目山亚种(&嘞£o铆弘gshygrospinosus et tianmushanensis理.var.Sanga1)[43。 图1链霉菌HA一8416菌丝形态(1600x) 000X) 图2链霉菌HA~8416孢子形态(15 表1 HA一8416与刺孢吸水链霉菌SF一104的区别 (二)活性物质的分离和化学结构 抑霉菌素产生菌发酵液,经阳离子交换树脂吸附提取、硅胶柱层析分离及制备型硅胶薄层层析纯 化即得纯品。具体流程如下: 发酵液 l阳离子交换树脂吸附,2N氨水洗脱 V 粗提物 上硅胶柱层析,洗脱剂异丙醇:水(8:2) 抑霉菌素粗品
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