放射性-%27125-I粒子持续低剂量率照射对PANC-1抑制作用与机制的研究.pdfVIP

实验二 放射性脚I粒子持续低剂量率照射 ‘ 对PANC一1抑制作用及机制的研究 前言 组织间近距离放射治疗是射线治疗人类恶性肿瘤的一种重要方式。临床资料显示，放射 性粒子永久性植入己成为近距离治疗的一种主要形式”一’。在治疗早期前列腺癌，疗效与根治 性手术和外放疗相似，但并发症低，已经被普遍接受和广泛应用。基础研究证实∞11几种细胞 lowdose 系包括前列腺癌PC-3细胞系，在持续低剂量率(conLinuousrate，CLDR)照射下， 同样具有低剂量超敏感现象。剂量率的改变和剂量依赖的放射损伤修复都影响了放射性粒子 的杀伤效应一相对生物效应(relativebiologicaleffectiveness，一RBE)。放射性粒子永久 性植入治疗胰腺癌，尽管在临床应用上还存在争议，但目前普遍认为此方法微创、操作简便、 疗效肯定，尤其是术中超声引导放射性粒子治疗胰腺癌，可以达NfP．好的姑息止疼作用和局部 控制效果，有一定的应用前景哺一’。然而放射性粒子对胰腺癌细胞的作用及RBE的基础研究尚 未见报道。本实验采用人胰腺癌细胞系PANC-1体外培养，在国产6711型把。I粒子CLDR照射 dose 及∞Co单次高剂量率(highrate，HDR)照射下，研究”。I粒子对PANC一1细胞的杀伤效 应及RBE，’并初步探讨了CLDR对PANC一1细胞抑制作用的机制。了解”3I粒子的RBE及作用机 制有重要意义，为放射性粒子治疗胰腺癌提供依据，并指导临床治疗。 材料与方法 (一)实验材料 1、细胞系 人胰腺癌细胞系PANC一1，由中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所赵晓航教授惠赠． 2、主要仪器和材料 671 (】) 1型123I粒子：由宁波君安药业科技有限公司提供，实验时单颗粒子活度为2．5 mCi(92．5 cGy／h。 MBq)，对应模型细胞照射平面初始剂量率为2．77 (2)60Co照射：在北京大学医学部钴源室进行，照射时放射源距细胞平面1。5m，剂量 率为：2．21Gy／min。 (3)C02孵育箱：德国Heraeus。 (4)流式细胞分析仪：美国BD公司。 (5)荧光显微镜：美国Beckman公司。 (6)!毫热恒温水浴箱：北京长安科学仪器厂。 (7)超净工作台：北京昌平长城空气净化工程公司。 (8)低温高速离心机：德国Hezlaeus。 (9)倒置显微镜：重庆光学仪器厂。 (10)培养皿：购自BD公司。 (1 1)冰箱：HaierBcd一238青岛海尔。 49 3、主要试剂 (1)DMEM培养基：购自HyClone公司。 (2)胎牛血清：购自杭州四季青生物制品公司。 (3)胰蛋白酶：购自G[BCO公司。 (4)凋亡试剂盒：购于北京博奥森生物技术有限公司。 (5)RNaSeA：购自GIBCO公司。 (二)方法 1、细胞培养 PANC—l细胞常规培养于DMEM培养基中。培养液中加入10％的胎牛血清，1％青、链霉素(青 度的孵育箱中培养，在这种条件下，细胞倍增时间为52h，每周换液2～3次，0．25％胰酶消 化传代，按1：2～3比例传代。取指数生长期细胞进行照射。 2、照射方式 mm直径等 (1)CLDR照射：参照国外文献阳·引，采用本实验一建立的14颗125I粒子以35 Ill[11，不同细胞培养平面的吸 距环形排布的离体照射模型，照射源距细胞平面的垂直距离为12 收剂量所对应的照射时间已