仪器分析（ 第二版） 教学课件 作者 董慧茹 主编 第七章 紫外与可见分光光度法.pptVIP

尚辅网 尚辅网 第七章 紫外与可见分光光度法 第一节 概述 第二节 紫外吸收光谱 第三节 光的吸收定律 第四节 紫外-可见分光光度计 第五节 显色反应及显色条件的选择 第六节 吸光度测量条件的选择 第七节 分光光度法的应用 第一节 概述 一、紫外-可见分光光度法的分类 1.按测量光的单色程度（即所含波长范围的宽窄程度）划分 （1）分光光度法 单色程度好，指应用波长范围很窄的光与被测物质作用而建立的分析方法（用棱镜和光栅进行分光） 二、物质对光的选择性吸收 溶液呈现的颜色是透过光的颜色，如左图 所示，也就是物质所吸 收光的互补色。 三、UV-VIS 法特点 灵敏度高 选择性好 应用范围广 设备和操作简单 价格低廉 第二节 紫外吸收光谱 一、紫外吸收光谱的产生 由分子中价电子能级的跃迁而产生。有机化合物分子的价电子主要有:形成单键的σ电子，形成双键的π电子，未成键的 n (p) 电子。当吸收一定能量后，这些价电子将跃迁到能量较高 的能级，形成紫外吸收光谱。 可能发生的跃迁种类: （1）成键轨道与反键轨道之间的跃迁 包括σ→σ*，π→π* （2）非键电子向反键轨道跃迁 包括 n →σ*，n →π* （3）电荷转移跃迁 所需能量大小： σ→σ*n→σ*π→π* n→π* 二、无机化合物的紫外吸收光谱 （1）荷移光谱 ① L→M ② M→L ③ M→M’ （2）配位场光谱 包括 f→f 和 d→d 跃迁 ② 溶剂 pH 的影响 第三节 光的吸收定律 三、吸光度的加和性 四、偏离比尔定律的原因 1.入射光非单色性引起的偏离 为讨论方便，假设入射光仅由波长λ1 和λ2 组成，对于λ1 ，吸光度为 A′，则 ， 三、吸光度读数范围的选择 在不同吸光度范围内读数会引起不同程度的误差，最适宜的读数范围为 0.2-0.8 之间。对于一个给定的光度计，透光率读数误差 是一个常数，约为±0.2％-±2％，但透光率读数误差不能代替测定结果误差，测定结果误差常用浓度的相对误差 Δc/c 表示。 第七节 分光光度法的应用 一、单一组分的测定 例如，邻二氮菲法测 Fe 2+，在 pH 3-8，形成橙红色配合物， λmax= 512 nm，ε=1.1× 104 二、高含量组分的测定 需采用示差法，即用比试液浓度（Cx）稍低的标准溶液（Cs）作参比，调节仪器的透光率为100%（A=0），然后测定试液的吸光度（Ar，称为相对吸光度）；若用普通法，以空白为参比，可测得试液与标准溶液的吸光度分别为 Ax 和 As，根据 Beer 定律： Ax= εbcx As= εbcs Ar = Ax – As = εb（cx - cs）= εb Δc cx = Δc + cs 三、多组分分析 1.吸收光谱不重叠 2.吸收光谱重叠 四、光度滴定 通过测定待测液吸光度的变化以确定反应终点的方法，称为光度滴定法。 这种方法是将盛有待测溶液的滴定池放入分光光度计的光路中，测定滴定过程中溶液的吸光度，并绘制滴定体积和对应的吸光度曲线，根据滴定曲线就可以确定滴定终点。 五、络合物组成及稳定常数的测定 摩尔比法： 设金