半胱胺、大豆黄酮对去卵巢大鼠骨代谢的影响(DG).docVIP

半胱胺、大豆黄酮对去卵巢大鼠骨代谢的影响 刘德义1,2， 许海军1， 侯加法1*， 周振雷1 （1南京农业大学，南京 210095；2 安徽科技学院，凤阳 233100） 摘要：120只3月龄体重相近的雌性大鼠随机分为4组（n=30），即即假手术组(Sham)、去卵巢对照组（OVX）、半胱胺组（OVX+CS）和大豆黄酮＋半胱胺组（OVX＋CS＋Da。Sham组和OVX组饲喂基础日粮，OVX+CS组日粮中添加300mg/kg的CS；OVX＋CS＋Da组添加300mg/kg的CS＋400mg/kg的Da；以研究半胱胺及大豆黄酮与半胱胺联合应用对大鼠骨代谢的影响。结果表明：半胱胺能显著提高GH水平，并对大鼠骨代谢有明显影响，但大豆黄酮和半胱胺联合应用与单独应用CS没有明显差异。 关键词：半胱胺；大豆黄酮；骨代谢；去卵巢；大鼠 大豆黄酮（Daidzein,Da）是异黄酮类植物雌激素，对于雌激素水平低者，大豆黄酮表现弱雌激素作用，可与成骨细胞的雌激素受体结合，加强成骨细胞的活性，促进骨基质的产生、分泌和骨矿化过程，研究表明大豆黄酮可预防和治疗骨质疏松症[1～4]。半胱胺（Cysteamine,CS）为生长抑素（SS）的耗竭剂，可显著降低大鼠、肉鸡、绵羊等的SS水平，提高内源性GH水平，促进生长[5～6]。GH是骨代谢的重要调节激素，研究发现，GH促进剂可影响骨转换生化指标，促进骨的再生，增加啮齿类动物骨矿含量，而且对成年正常人骨量也有重要影响[8～9]。实验证实，GH与雌激素协同作用可改善绝经后妇女骨质疏松症[10]。尽管对半胱胺研究取得较快进展，但有关CS提高动物GH水平对骨质疏松症模型大鼠防治作用的研究还未见报道。本试验通过在日粮中添加CS、CS＋Da，研究其对骨质疏松症大鼠骨代谢的影响，为CS的临床应用提供依据。 1材料与方法 1.1试验动物与分组 120只3月龄雌性SD大鼠，体重227±19.6g。预饲一周后，按体重随机分为4组（n=30），即假手术组（Sham）、去势对照组（OVX）、半胱胺治疗组（OVX+CS）和大豆黄酮＋半胱胺治疗组（OVX+CS+Da）。 1.2药品与方法 药品：半胱胺（CS）购于上海华扩达生化实业有限公司；大豆异黄酮购于山东天维生物制品有限公司。 方法：假手术组、去卵巢对照组饲喂基础日粮（标准全价颗粒料由南京安立默科技公司提供），大鼠分笼饲养，3只/笼，自由饮水与采食，室温恒温（18～20℃），每天光照12h，每2d称量各组大鼠体重。OVX+CS治疗组在基础日粮中添加300mg／kg的CS，OVX+CS＋Da治疗组在基础日粮中添加300mg／kg的CS＋400mg/kg的Da。试验期180d。试验开始后第90d和180d各屠宰半数试验动物，取静脉血5mL，肝素抗凝，分离血浆，置–30℃保存备测，分离大鼠股骨、椎骨，将其浸入生理盐水中，–30℃保存用于骨密度测定。 1.3测定指标与方法 血浆碱性磷酸酶（AKP）：磷酸苯二钠法；试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。 骨钙素（BGP）、降钙素（CT）、生长激素（GH）的测定：放射免疫测定法，试剂盒购自北京东亚免疫技术研究所。 雌二醇（E2）测定：放射免疫测定法，试剂盒购于天津九鼎医学生物工程有限公司。 骨密度测定：骨密度测定采用BMD400型（中国原子能科学研究院）骨密度仪，采用单光子吸收法（SPA），放射源为I125。 1.4数据分析 试验数据采用SPSS7.5+统计软件处理。所有数据以均数±标准差（±SD）表示，并经t检验处理，p＜0.05为差异显著，p＜0.01为差异极显著。 2结果 2.1试验期间各组大鼠血浆AKP及BGP水平变化 试验结束时，各组大鼠血浆AKP和BGP水平变化见表1。 表1 各组大鼠血浆AKP和BGP水平变化 Table1 The variation of plasma AKP and BGP of rats in different groups 参数Parameter 组别Group 样本数n 90天90th d 180天180th d AKP（KAU/dL） Sham 14 15.14±6.15a 14.99±5.18a OVX 15 22.46±7.24a 20.78±4.80ab OVX+CS 12 21.43±12.31a 22.60±14.01b OVX+CS+Da 12 20.31±10.61a 22.31±11.10ab BGP(ng/mL) Sham 12 1.63±0.67aA 1.52±0.57aA OVX 14 2.11±0.87bAB 2.39±1.08bAB OVX+CS 13 2.36±0.61cB 2.97±0.77bB OVX+CS+Da 11 1.56±0.74a