PEG修饰脂膜对延长脂质体在血内循环时间的研究.pdfVIP

维普资讯 药学学报 ActaPharmaceuticaSinica1996，31(6)l451～454 451 tt． f L} PEG修饰脂膜对延长脂质体在血 内循环时间的研究 侯新朴 张俊 鲁先道 777、毛 (北京医科大学物化教研室．北京 l00083) ^ 九 摘翼 研究 目的是提高脂质体的稳定性 ，延长在血循环 中的时间．增强在非RES部位的靶向性。 将不同分子量的pEG—PE(聚乙二醇单 甲醚磷脂酰乙醇胺衍生物)掺入脂质体 ，比较其在体外的稳定 性和体 内的分布情况a鸟§果表明．该类脂质体在血循环中的滞留时间显著延长 。并且与PEG的分子量 有密切关系 。车研究方法简便易行．从而省去同位紊标记的困难 ．具有 良好的应用前景。 关-调望墅坠 r 碌 乡锄 脂质体是一种很有发展前途的药物载体 ，它经静脉注入体内后 ，很快被网状内皮组织系统 (RES)识别吸收[，这对于治疗 RES系统的疾病非常有利，但对于非RES部位，却缺乏靶 向性 。 为了克服上述缺陷，近几年来，学者们从膜修饰的角度出发进行探索 ，曾有研究报道 ，将聚乙二 醇 (PEG)与牛血清 白蛋白偶联，可延长该物质在血循环中的寿命。据此，Blume等r采用聚乙二 醇单甲醚 (PEG—MM)与磷脂酰乙醇胺 (PE)结合成酯(PEG—PE)，将其组装于脂质体膜上，对延 长血循环中脂质体寿命取得了较好结果。本文将分子量不同的PEG-PE组装于脂膜上，将荧光 物质 calcein包载其中，进行体外稳定性和体内分布研究，并与未经修饰脂质体进行比较。 材 料 与 方 法 动物 雌性 ，体重20~25g的昆明种小鼠，北京医科大学动物部提供。 药 品 卵磷脂 (EI~3，自提)，胆固醇 (Chol，Sigma进 口分装)，钙黄绿紊 (calcetn，Sigma)，聚 乙二醇单 甲醚 (PEG—MM，Sigma)，二棕榈酰磷脂酰乙醇胺 (DPPE，S~ma)，TritonX-1O0(S~na)。 脂质体的制备 按文献0用分子量为2000和5000的PEG—MM与 DPPE合成PB0。D¨一PE及 PEGsooo—PE，并进行纯化 ，然后制备大单层脂质体 。其中水相为pH7．4磷酸缓冲液 ，舍86mmol calc~in。制得脂质体通过0．2m 微孔滤膜两次，以控制脂质体的粒径 ，再通过葡聚糖凝胶柱，以 分离游离的calcein。收集 PEG2D口一PE及 PEGs一一PE荧光脂质体进行实验。 脂质体的血清诱导渗漏实验 取小牛血清3．0ml，加入荧光脂质体0．2IIll，混匀，37C恒 温，于不同时间间隔取样10 ，稀释，用岛津RF一540荧光分光光度计测定样品的荧光值 FI(Ex 一 490nm，Em=520nm)，然后 向样品中加入200 10 Tritonx一100，使脂质体破裂 ，释出全 部荧光物质，取样10vi，稀释，测荧光值F 。 脂质体在血循环 中的清除 按5ml·kg 将荧光脂质体给小 鼠尾静脉注入，计 时，于不同 时间间隔从尾静脉取血10 ，稀释 ，离心，取上清液测定荧光值R，。 本文于1995年 {月21日收到 ． 圉家 自然辩学基金资助项 目 维普资讯 药学学报 ActaPharmaceuticaSinica1996，31(6)．451~454 瞻质体在体内的分布 按5ml·lg【将荧光脂质体给小鼠(3只／组)尾静脉注入，在一定时 间间隔将小鼠处死，取血 ，并取出肝、脾 ，吸干，称重 ，匀浆，离心取上清液测定荧光值。 a互 占