小鼠肝脏窦状内皮细胞分离和培养的一种新方法.pdfVIP

第 30 卷第 1期 国际病理科学与临床杂志 　　h ttp : / /www. gjb l. net Vol. 30　No. 1 20 10 年 1月 International Jou rnal of Pathology and Clin ical M edicine Jan. 　20 10 ·Articles · ·论 　著 · 小鼠肝脏窦状内皮细胞分离和培养的一种新方法 赵秀华 , 罗彬 , 罗盘 , 程腊梅 ( 中南大学生殖与干细胞工程研究所, 长沙 4 10078) ( ) [摘要 ] 　 目的:建立小鼠肝窦状内皮细胞 liver sinu so idal endothelial cells, L SEC 的分离培养方法 , 研究其生 物学特性 。方法 : 中性蛋白酶消化小鼠肝脏组织 , Perco ll密度梯度离心分离消化后的细胞悬液 ,用内皮细胞筛选培 养基及酶差异消化法纯化 L SEC;免疫细胞化学染色检测 L SEC 的表面标志 ,分析 L SEC 的超微结构 ,观察 D iI荧光 ( ) 标记的乙酰低密度脂蛋白 acetylatedlow den sity lipop rotein, D iIA cLDL 摄取能力 , 以体外成血管能力分析 L SEC 的 功能 。结果 :分离纯化后的细胞呈典型鹅卵石样 内皮细胞形态 ,这些细胞表达 V III因子 ,不表达 CD31, CD90 和 CK19 ,具有窦状内皮细胞特征性的窗孔结构 ;能摄取 D iIA cLDL ,并有一定的成血管能力 。结论 :建立了一种分离 、 培养 L SEC 的方法 ,为研究 L SEC 的功能奠定了基础 。 [关键词 ] 　肝窦状内皮细胞 ; 　条件培养基 ; 　窗孔 ; 　成血管结构 ; 　小鼠 do i: 10. 3969 / j. issn. 20 10. 01. 00 1 A new m ethod for the isola tion and culture of liver sinu so ida l endothelia l cells ZHAO X iuhua, LUO B ing, LUO Pan , CHEN G L am ei ( Institu te of R ep roductive and S tem Cell E ng ineering, Cen tra l S ou th Un iversity, Changsha 4 10078, Ch ina) [ A b stract] 　O bjective　 To estab lish a m ethod for the iso lation and cu ltu re of mou se liver sinu