HRP的电化学固定化及HRP_P_OPD酶电极的性能.pdfVIP

第 36 卷　第 2 期 . 36　 . 2 ( ) V o l N o 厦门大学学报 自然科学版 　1997 年 3 月 ( ) M ar. 1997　 Jou rn a l o f X iam en U n iver sity N atu ra l Scien ce 的电化学固定化及 H R P H R P P O PD 酶 电 极 的 性 能① 陈滨晖　吴辉煌　张瀛洲 ( 厦门大学化学系　固体表面物理化学国家重点实验室　厦门　36 1005) 摘要　利用电化学固定化方法制备含辣根过氧化物酶的聚邻苯二胺( ) 膜电极, HR P P O PD 改变聚合用溶液的酸度和所含支持电解质的成分, 研究酶的固定化过程及其对所得酶电极性能的 影响. 结果表明依电聚合条件而异, 酶可能以不同途径进入聚合物基质中. 支持电解质的品种会影响 酶膜的形成速度、组成和稳定性. 所得 膜电极可在溶液不含电子传递体的条件下催化 HR P P O PD H 2O 2 的还原, 电聚合过程中进入酶膜的寡聚体可能充当酶的电子传递体. 关键词　电流式酶电极, 辣根过氧化物酶, 聚邻苯二胺, 电化学固定化酶 中国图书分类号　 646 O 过氧化物酶电极不仅用于检测过氧化物和某些芳香化合物, 而且可与其它酶种构成多酶 [ 1～ 6 ] 电极, 具有宽广的应用范围 . 近年来人们利用电化学固定化技术制备辣根过氧化物酶电 极[3～ 6 ] , 然而酶的固定化机理以及固定化条件对所得酶电极性能的影响仍需进一步研究. 邻苯 [7 ] 二胺电化学聚合的主要产物是含有吩嗪环结构单元的梯状聚合物 , 并具有某些独特的性 [ 8 ] 能 . 为此, 本工作利用邻苯二胺的电聚合制备含辣根过氧化物酶的聚邻苯二胺膜电极, 并探 讨酶的固定化机理以及固定化条件对所得酶电极性能的影响. 1　实验部分 1. 1　试剂及溶液 邻苯二胺(O PD ) , 化学纯,B. P. 10 1～ 104 ℃. 辣根过氧化物酶(H R P ) , E. C. 1. 11. 1. 7, 250 , . ～ 3, 上海生化试剂总厂生产. 、 、 、 、 和 u m g R Z H 3BO 3 N a4B 2O 7 N aC l N a2H PO 4 N aH 2 PO 4 H 2O 2 均为分析纯试剂. 电解质溶液均用三次蒸馏水配制. 磷酸盐缓冲液由0. 1 2 4 和 2 4 组