实验十一水中细菌总数和大肠菌群数的检测.pptVIP

实验十一 水中细菌总数和大肠菌群数的检测 一、实验目的 1、学习并掌握水体细菌学的检验 2、学习测定水中大肠菌群数量的多管发酵法 二、实验原理 1、细菌总数的测定：采用稀释平板法（混合平板法） 三、实验材料 1、水样 2、培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、3倍浓缩乳糖蛋白胨培养 基（带指形管）、伊红美兰固体培养基 四、实验方法 （一）水中细菌总数的测定（混合平板法） 1、样品采集和稀释 自来水、纯净水、饮料作原样、 10-1 、10-2三个稀释度 污水作10-1 、10-2 、10-3三个稀释度 2、取3个稀释度样品各1ml于平皿中，再倒入50℃左右牛肉 膏蛋白胨培养基约15ml，轻轻转动混合均匀。凝固后37 ℃倒置培养。每个稀释度作3个重复。 细菌总数＝同一稀释度平板上菌落平均数×稀释倍数 （最好在30~300个之间） 五、思考题 1、记录每组样品中所测得的细菌总数和大肠菌群数。 2、典型的大肠杆菌群菌落特征是什么？ * * 2、大肠菌群数的测定：采用多管发酵法（MPN法） 大肠菌群以大肠杆菌为主，能在37℃48h内发酵乳糖产酸、 产气。大肠菌群数可作为判断水源或食品污染的指标。 最大概率数法：对未知样品进行十倍稀释，然后根据估算取三个连续的稀释度平行接种多支试管，对这些平行试管的微生物生长情况进行统计，长菌的为阳性，未长菌的为阴性，然后根据数学统计计算出样品中的微生物数目。 （二）水中大肠菌群数的测定 1、初发酵实验 在3倍浓缩乳糖培养基中加入3个梯度样品各10ml（5个重 复），混匀37 ℃培养24h。 2、平板分离 不产酸不产气和不变浑浊 阴性 产酸产气或仅产酸 阳性 菌落为深紫黑色，具 金属光泽或紫黑色不 带金属光泽或淡紫红 色中心较深 3、结果计算 根据阳性管数查表得大肠菌群数。 划线接种于伊红美兰平板，37 ℃培养24h * * *